electroforesis

Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán
Medicina Veterinaria y Zootecnia

Practica 5. Separación e identificación de proteínas lácteas por electrogénesis en gel de poliacrilamida –SDS.

Garduño Luna Daniela
Jiménez Ibarra Jair de Jesús
López Salgado Nancy
Portilla Fuentes Héctor

Equipo 6

M en C Ma. Del Carmen Barrón García
QFB. JuanaAlicia Alquicira Camacho

Grupo: 1103

Fecha: 07/octubre/2011

Índice

Portada...............................1
Indice..................................2
Resumen.............................3
Introducción.......................4
Objetivos.............................5
Materiales...........................5
Metodología......................6
Resultados..........................8Discusión.............................9


Resumen
De inicio podemos decir q nuestro objetivo es poder comprende cómo es q se da la separación de las proteínas x medio de la electroforesis y ya hecho esto poder identificar las proteínas obtenidas.
La técnica es un tanto compleja y laboriosa, pues e tienen q elaborar 2 geles, el separador y el concentrador, los cuales requieren de un cuidado especiala la hora de la preparación sobre todo al final cuando se agrega el TEMED pues es el que solidifica al gel y entonces la solución debe de ser depositada con cuidado y rapidez entre las dos placas de vidrio; cabe mencionar q también hay q tener cuidado a la hora de realizar los cálculos de los demás reactivos pues una pequeña falla en medición pude hacer q la sustancia no gelifique y el trabajo elexperimento no funcione; una vez introducidos los dos geles, se procede a poner un peine para formar los pozos donde se agregaron las muestras. Una vez gelificado se retiró el peine y se lleno en el segundo pozo con una solución de albumina y a partir del tercero con 20 micro litros de muestra. Una vez en la cámara de electroforesis esta se cierra y se conecta a la fuente de poder. Como esteproceso requiere de tiempo para que podamos obtener el resultado en el salón se utilizaron los trabajos de compañeros de otro grupo y así se pudo medir cada una de las proteínas.
Pudimos observar 6 bandas para la medición e identificación de las proteínas.

Introducción
Una molécula con una carga eléctrica se desplazará e un campo eléctrico, este fenómeno conocido como electroforesis ofrece unprocedimiento para poder separar las proteínas. La velocidad de migración de una proteína en el campo eléctrico depende de la fuerza del campo, la carga neta d la proteína y el coeficiente de fricción.
Este tipo de separaciones se lleva a cabo casi siempre sobre gel, ya que este sirve como un tamiz molecular que potencia la separación.

Para q se pueda dar la electroforesis necesitamos incluir undetergente de carga sumamente negativa llamado disulfato de sodio (SDS) que provoca que las proteínas migre hacia el polo positivo al aplicar un voltaje. La técnica de la electroforesis requiere de dos geles (separador y compactador) los cuales son de distinta porosidad y pH para q puedan en primera instancia compactan las muestras y luego separarlas. Estos geles de poliacrilamida son el mediopara q la separación se pueda dar debido a sus propiedades tales como: elasticidad, porosidad controlable, transparencia y compatibilidad con muchos compuestos químicos.
La poliacrilamida junto don SDS, tetrametiletiléndiamina y persulfato de amonio son empleados para la elaboración del gel. Y el TEMEN y persulfatos son los que provocan que la solución se gelifique. Y así poder obtener el gelcorrectamente elaborado para poder observar los resultados y por medio de esa separación identificar a las proteínas:
Objetivos

a) Comprender los principios de la separación de proteínas por medio de la técnica de la electroforesis.
b) Conocer la importancia de los marcadores de peso molecular para la identificación de proteínas separadas.
c) Identificar las proteínas separadas y determinar su...