enzimas
Páginas: 5 (1159 palabras)
Publicado: 18 de abril de 2013
ADN y análisis forense
Introducción
El ADN es un polímero formado por dos cadenas antiparalelas constituidas por nucleótidos, unidos en forma covalente a través de uniones fosfodiester, descripta por primera vez por James Watson y Francis Crick en 1953. Cada nucleótido contiene: un azúcar (la desoxirribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada. En el ADN hay cuatro nucleótidos diferentesque difieren solamente en la base nitrogenada. Estas son la adenina (A), la citosina (C), la guanina (G) y la timina (T). Las dos cadenas están estabilizadas por la formación de puentes de hidrógeno entre las bases complementarias de cada cadena (A-T, C-G). A cada apareamiento lo llamamos par de bases.
ADN nuclear
El ADN nuclear es lineal y se encuentra formando parte de los cromosomas. Unacélula diploide de un ser humano contiene 23 pares de cromosomas. Los 23 cromosomas contienen en total 3 mil millones de pares de bases aproximadamente. De éstas una muy pequeña proporción corresponde a genes.
La mayoría de los genes determinan cuáles son y en que orden estarán dispuestos los aminoácidos de una determinada proteína. A este ADN lo conocemos como ADN codificante. Sin embargo lamayor parte del ADN nuclear es no codificante. Parte del ADN no codificante está constituido por ADN repetitivo que como su nombre lo indica corresponde a diferentes secuencias de ADN que se encuentran repetidas a lo largo de todo el genoma. Dentro de éstas encontramos las de repetición interdispersa o intercalada que corresponde a secuencias de número variable de bases que se encuentran repetidas endiferentes lugares del genoma. Otras secuencias llamadas satélites están repetidas en tándem, como los vagones de un tren. De acuerdo a su tamaño se las clasifica en satélites, mini y microsatélites.
El número de repeticiones varía de una persona a otra. Justamente el análisis del ADN en identificación forense se basa en el análisis de estas repeticiones de corto tamaño denominadas STR (ShortTandem Repeat).
Cada número de repeticiones corresponde a un alelo determinado. Por alelo entendemos las diferentes formas posibles de un marcador genético. En el caso de que una persona tenga dos mismos alelos para un determinado marcador se dice que es homocigota, si los alelos son diferentes para un mismo marcador entonces es heterocigota.
Metodología
La ventaja de estudiar el ADN radicano sólo en su estabilidad sino también en que el ADN es idéntico tanto si se lo analiza en sangre, hueso, semen, etc. Además de que el análisis permite una inclusión superior al 99.99%.
En la actualidad los métodos de detección del ADN requieren de una cierta cantidad de tal forma que el ADN extraído debe ser amplificado. Esto se logra mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa(PCR) que revolucionó las ciencias biológicas y que le valió el premio el premio Nobel de Química en el año 1993 a Kary Mullis. Esta técnica hace posible producir millones de copias de una determinada secuencia de ADN.
Para ello se desnaturaliza el ADN obtenido y se lo incuba luego con oligonucleótidos o “primers” que están compuestos de aproximadamente una veintena de nucleótidos queson complementarios a los extremos de la secuencia de ADN a amplificar. La polimerización la realiza una enzima que es la Taq polimerasa. Esta enzima inicialmente fue obtenida de Thermus aquaticus (en la actualidad se obtiene por ingeniería genética), una bacteria termófila que habita en geisers y por lo tanto resiste altas temperaturas.
Luego de varios ciclos, alrededor de 30-35 ciclos, seobtienen millones de copias.
Una vez amplificado la zona deseada del ADN, en este caso las secuencias repetidas en tándem, se identifica el tamaño de los alelos mediante una electroforesis en gel y posterior comparación con marcadores de tamaño conocido.
Los comienzos
La aplicación del estudio de estas secuencias en el campo de la medicina forense fue descubierta por Alec Jeffreys de la...
Introducción
El ADN es un polímero formado por dos cadenas antiparalelas constituidas por nucleótidos, unidos en forma covalente a través de uniones fosfodiester, descripta por primera vez por James Watson y Francis Crick en 1953. Cada nucleótido contiene: un azúcar (la desoxirribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada. En el ADN hay cuatro nucleótidos diferentesque difieren solamente en la base nitrogenada. Estas son la adenina (A), la citosina (C), la guanina (G) y la timina (T). Las dos cadenas están estabilizadas por la formación de puentes de hidrógeno entre las bases complementarias de cada cadena (A-T, C-G). A cada apareamiento lo llamamos par de bases.
ADN nuclear
El ADN nuclear es lineal y se encuentra formando parte de los cromosomas. Unacélula diploide de un ser humano contiene 23 pares de cromosomas. Los 23 cromosomas contienen en total 3 mil millones de pares de bases aproximadamente. De éstas una muy pequeña proporción corresponde a genes.
La mayoría de los genes determinan cuáles son y en que orden estarán dispuestos los aminoácidos de una determinada proteína. A este ADN lo conocemos como ADN codificante. Sin embargo lamayor parte del ADN nuclear es no codificante. Parte del ADN no codificante está constituido por ADN repetitivo que como su nombre lo indica corresponde a diferentes secuencias de ADN que se encuentran repetidas a lo largo de todo el genoma. Dentro de éstas encontramos las de repetición interdispersa o intercalada que corresponde a secuencias de número variable de bases que se encuentran repetidas endiferentes lugares del genoma. Otras secuencias llamadas satélites están repetidas en tándem, como los vagones de un tren. De acuerdo a su tamaño se las clasifica en satélites, mini y microsatélites.
El número de repeticiones varía de una persona a otra. Justamente el análisis del ADN en identificación forense se basa en el análisis de estas repeticiones de corto tamaño denominadas STR (ShortTandem Repeat).
Cada número de repeticiones corresponde a un alelo determinado. Por alelo entendemos las diferentes formas posibles de un marcador genético. En el caso de que una persona tenga dos mismos alelos para un determinado marcador se dice que es homocigota, si los alelos son diferentes para un mismo marcador entonces es heterocigota.
Metodología
La ventaja de estudiar el ADN radicano sólo en su estabilidad sino también en que el ADN es idéntico tanto si se lo analiza en sangre, hueso, semen, etc. Además de que el análisis permite una inclusión superior al 99.99%.
En la actualidad los métodos de detección del ADN requieren de una cierta cantidad de tal forma que el ADN extraído debe ser amplificado. Esto se logra mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa(PCR) que revolucionó las ciencias biológicas y que le valió el premio el premio Nobel de Química en el año 1993 a Kary Mullis. Esta técnica hace posible producir millones de copias de una determinada secuencia de ADN.
Para ello se desnaturaliza el ADN obtenido y se lo incuba luego con oligonucleótidos o “primers” que están compuestos de aproximadamente una veintena de nucleótidos queson complementarios a los extremos de la secuencia de ADN a amplificar. La polimerización la realiza una enzima que es la Taq polimerasa. Esta enzima inicialmente fue obtenida de Thermus aquaticus (en la actualidad se obtiene por ingeniería genética), una bacteria termófila que habita en geisers y por lo tanto resiste altas temperaturas.
Luego de varios ciclos, alrededor de 30-35 ciclos, seobtienen millones de copias.
Una vez amplificado la zona deseada del ADN, en este caso las secuencias repetidas en tándem, se identifica el tamaño de los alelos mediante una electroforesis en gel y posterior comparación con marcadores de tamaño conocido.
Los comienzos
La aplicación del estudio de estas secuencias en el campo de la medicina forense fue descubierta por Alec Jeffreys de la...
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