Espectrofotometía En Laboratodio De Biotecnología

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

ESCUELA DE POST GRADO

MAESTRIA EN TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS
FACULTAD DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

Introducción a la Espectro Fotometría en el análisis de Alimentos
Recopilación del curso

Ing. Santos Jaimes Serkovic

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA MAESTÍA TECNOLOGIA DE ALIMENTOS

Introducción a la Espectro Fotometría en el análisis deAlimentos
Recopilación del curso
LIMA 2006

2

Ing. Santos Jaimes Serkovic, sanjaise@gmail.com

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Introducción a la Espectro Fotometría en el análisis de Alimentos
Recopilación del curso
ÍNDICE
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

Página
3

RELACIONES ENTRE LA ABSORCIÓN DE LUZ Y COLOR

4

ABSORCIÓN DE ENERGIA

5TIPOS DE LUZ

6

LEYES FUNDAMENTALES DE LA FOTOMETRÍA

8

LEY DE BERNARD

9

ESPECTROFOTOMETROS

10

ESQUEMA SIMPLE DE UN ESPECTROFOTOMETRO

11

SISTEMA DE MONTAJE EMPLEANDO PRISMAS

14

RED DE DEFRACCIÓN O EMPARALLADO

15

TIPOS DE ESPECTROFOTOMETROS

19

a)

ESQUEMAS DE INSTALACIÓN
ESPECTROFOTOMETRO DE EMISIÓN DE LLAMA

22

b)

ESPECTROFOTOMETRO DEABSORCIÓN ATÓMICA

23

ESPECTROFOTOMETRO DE LECTURA DIRECTA

24

ESPECTROFOTOMETRO DE DOBLE HAZ

25

CROMATOGRAFÍA

26

CLASES DE CROMATROGRAFÍA

32

I

CROMATOGRAFÍA DE PAPEL

33

II

CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA

35

CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA

38

TÉCNICAS DE SEPARACIÓN

40

CROMATOGRAFÍA DE GASES

41

3.3

3

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Recopilación del curso
ESQUEMA DE INSTALACIÓN DE UN APARATO PARA
CROMATOGRAFÍA DE GASES.
III

42

SISTEMA HPLC

44

ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
REGIONES QUE LO FORMAN
RAYOS GAMMA
1 A°
10 A°

Rayos "X"
Rayos X Suaves

100 A°
Vacio UV2000 A°
Cerca de visible UV
4000 A°
0.4 u VISIBLE
8000 A°

CERCA DE INFRARROJOS

0.8 u
25 u

Infrarrojos

400 u

Lejos del IR

25 cm

Microondas
Radio Ondas

1 km

4

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Recopilacióndel curso
RELACIONES ENTRE LA ABSORCIÓN DE LUZ Y COLOR
REGIÓN DE LONGITUD ONDA.
mu
MILIMICRA
< 380
380-435
435-480
480-490
490-500
500-560
560-580
580-595
595-650
650-780
> 780

Color
Transmitido
Ultravioleta
Violeta
Azul
Azul verdoso
Verde azuloso
Verde azuloso
Verde amarillento
Amarillo
Anaranjado
Rojo
Cerca de Infrarrojo

La luz visible representa una parteelectromagnético.
Se extiende de 380 a 780 mu (milimitra)

muy

pequeña

del

espectro

La región ultravioleta se extiende de 185 m u hasta la visible.
La longitud de onda mas cortas son consideradas como la región mas lejana (o
de vacío) ultravioleta.
Unidades m u = 10-7 mm = mu
10
Aº = milimitron = 1 millón de m.
1000

(1 mil millonésimo de m)

La onda electromagnética varía entrecuatrilloncico de metro y 100, 000 km de
longitud.

5

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Recopilación del curso
ABSORCIÓN DE ENERGIA

P

P
DISPERSION

b
Cuando un haz de energía choca contra una sustancia le pueden sucedervarias cosas.
- Ser absorbida
- Ser reflejada
- Ser transmitida
- Ser dispersada
- Ser refractada
La longitud del trayecto óptico es “b”
Efecto de Luz de haz sobre un objeto:
1. Puede pasar a través de la materia habiendo solo una pequeña absorción y
por lo tanto poca perdida de energía se mide % de luz transmitida.
2. La dirección de la propagación del haz puede ser alterado por :
o...