Estudio De Una Ruta Metabólica
Páginas: 3 (617 palabras)
Publicado: 10 de noviembre de 2012
Práctico de Bioquímica BCM 2012
Estudio de una ruta metabólica
Objetivos:
a- Estudiar la cinética de crecimiento de cultivo d e levaduras.
b- Evidenciar la glucólisis en el cultivo delevaduras, evaluando el consumo de glucosa y
producción de CO2.
c- Evaluar el efecto de un inhibidor de la gliceraldehído -3-fosfato deshidrogenasa sobre el
crecimiento, el consumo de glucosa y laviabilidad celular en el cultivo de levaduras.
Curva de crecimiento de los cultivos con y sin inhibidor a 600nm
Mesa 4: Con Inhibidor de la glucólisis
Mesa 1: Sin inhibidor de la glucólisis.
Tiempo
T0T1/2
T1
T2
T7
T48
Tiempo
0
0.5
1
2
7
48
A 600nm
0.268
0.348
0.392
0.358
0.346
0.275
0,5
A 600nm
0.135
0.251
0.295
0.352
0.384
0.192
Curva de crecimiento
A600nm
0,4
0,3
C/Inh
0,2
S/Inh
0,1
0
0
0,5
1
2
7
48
Tiempo
Curva de calibración
Tubo
1
2
3
4
A 570
0.230
0.389
0.469
0.600
Sandra Núñez B12
A570
Práctico de Bioquímica BCM 2012
0,7
Curva de calibración
y = 0,0595x + 0,1245
0,6
0,5
0,4
A 570
0,3
0,2
0,1
0
0
[
2
4
6
8
10
[GLU]
]
[]
= 3.8= 5.1
= 7.8
= 10
Consumo de Glucosa
Tiempo
0
0.5
1
2
7
48
A 570
0.438
0.423
0.401
0.512
0.393
0.330
A 570
Sobrenadante
Consumo de Glucosa
0,6
0,5
0,4
0,3
0,20,1
0
A 570
0
20
40
Producción de CO2
Sandra Núñez B12
T
60 iempo
Práctico de Bioquímica BCM 2012
1. Control: Hubo glucólisis, por lo tanto hubo producción de CO 2 , elcolorante rojo fenol
se tornó color anaranjado, se acidificó.
2. Con inhibidor: no hubo glucólisis, no se produjo CO2 , por lo tanto no cambió de color
3. Buffer: Hubo glucólisis pero no se dio laproducción necesaria de CO 2 , el buffer
amortiguó el cambio de pH entonces no cambió de color.
Ensayo de viabilidad con Trypan blue
Trypan blue es un colorante (azul) que nos permite evaluar la...
Estudio de una ruta metabólica
Objetivos:
a- Estudiar la cinética de crecimiento de cultivo d e levaduras.
b- Evidenciar la glucólisis en el cultivo delevaduras, evaluando el consumo de glucosa y
producción de CO2.
c- Evaluar el efecto de un inhibidor de la gliceraldehído -3-fosfato deshidrogenasa sobre el
crecimiento, el consumo de glucosa y laviabilidad celular en el cultivo de levaduras.
Curva de crecimiento de los cultivos con y sin inhibidor a 600nm
Mesa 4: Con Inhibidor de la glucólisis
Mesa 1: Sin inhibidor de la glucólisis.
Tiempo
T0T1/2
T1
T2
T7
T48
Tiempo
0
0.5
1
2
7
48
A 600nm
0.268
0.348
0.392
0.358
0.346
0.275
0,5
A 600nm
0.135
0.251
0.295
0.352
0.384
0.192
Curva de crecimiento
A600nm
0,4
0,3
C/Inh
0,2
S/Inh
0,1
0
0
0,5
1
2
7
48
Tiempo
Curva de calibración
Tubo
1
2
3
4
A 570
0.230
0.389
0.469
0.600
Sandra Núñez B12
A570
Práctico de Bioquímica BCM 2012
0,7
Curva de calibración
y = 0,0595x + 0,1245
0,6
0,5
0,4
A 570
0,3
0,2
0,1
0
0
[
2
4
6
8
10
[GLU]
]
[]
= 3.8= 5.1
= 7.8
= 10
Consumo de Glucosa
Tiempo
0
0.5
1
2
7
48
A 570
0.438
0.423
0.401
0.512
0.393
0.330
A 570
Sobrenadante
Consumo de Glucosa
0,6
0,5
0,4
0,3
0,20,1
0
A 570
0
20
40
Producción de CO2
Sandra Núñez B12
T
60 iempo
Práctico de Bioquímica BCM 2012
1. Control: Hubo glucólisis, por lo tanto hubo producción de CO 2 , elcolorante rojo fenol
se tornó color anaranjado, se acidificó.
2. Con inhibidor: no hubo glucólisis, no se produjo CO2 , por lo tanto no cambió de color
3. Buffer: Hubo glucólisis pero no se dio laproducción necesaria de CO 2 , el buffer
amortiguó el cambio de pH entonces no cambió de color.
Ensayo de viabilidad con Trypan blue
Trypan blue es un colorante (azul) que nos permite evaluar la...
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