extracción de papaina, métodos
OBTENCIÓN DE PAPAÍNA DE Carica papaya UTILIZANDO ESTRATEGIAS BIOSEPARATIVAS QUE SE BASAN EN LAFORMACIÓN DE COMPLEJOS INSOLUBLES ENTRE POLÍMEROS IÓNICOS Y PROTEÍNAS.
Rocha,M.V.;Braia, M. J.;Porfiri, M.C.; Ferrero, M; Romanini, D.
Laboratorio de Fisicoquímica Aplicada a la Bioseparación. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario - CONICET. Suipacha 570. Rosario. E-mail: dromanini@conicet.gov.ar. JorFyBi, 2011.
La papaína es una enzima proteolíticaque se extrae de látex de papaya (Carica papaya). Posee la capacidad de digerir las proteínas de los alimentos de manera similar a la que actúa la pepsina. Se usa principalmente como ablandador de carnes y también en la clarificación de cervezas y otras bebidas. También es de gran utilidad para suavizar las lanas, así como en el curtido de las pieles, en la fabricación de caucho y en la preparaciónde productos medicinales, remedios caseros, etc. En este proyecto nos hemos propuesto como objetivo obtener papaína a partir de cultivos regionales de papaya utilizando estrategias bioseparativas que se basan en la formación de complejos insolubles entre PAA100.000 y la papaína. El látex fresco fue obtenido por incisiones longitudinales realizadas en el fruto de papaya de la región. Los complejospapaína/ PAA100.000 mostraron que éstos son insolubles a pHs menores a 4,0 y que la relación molar de precipitación fue de 39 moles de papaína por mol de PAA100.000. Los resultados obtenidos al determinar la actividad enzimática de papaína del látex se demostraron que en la fracción precipitada y redisuelta presenta una mayor actividad que la hallada en el control. Esto se debe a que la actividadde la enzima se incrementa notablemente en presencia del PAA 100.000. Dicho efecto ha sido evidenciado en experimentos previos donde se evaluaron la estabilidad del sitio catalítico en presencia de concentraciones crecientes de PAA100.000. Este método aplicado al látex fresco extraído de una planta de papaya (Carica papaya). Los resultados obtenidos demostraron un factor de purificaciónrelativamente bajo (2,26) lo que indica que esta metodología no resuelve eficientemente la separación de la papaína de las demás proteínas que componen el látex. Por otro lado, se obtuvo un rendimiento mayor al 100% debido a lo expuesto anteriormente. Este valor excesivo del rendimiento, sin embargo, sugiere una alta tendencia de la papaína a precipitar. Hasta aquí, estos resultados demuestran que lametodología de precipitación con PAA100.000 sólo permite ser utilizada como paso extractivo previo a otro protocolo de purificación. Si bien la precipitación no depura en gran medida a la enzima de las contaminantes, la muestra se concentra en la proteína de interés. La optimización de las condiciones aplicadas seguramente lograrán resultados más auspiciosos en un futuro cercano.
Extracción del...
Regístrate para leer el documento completo.