Extracción Sanguínea Y Frotis

TOMA DE MUESTRA SANGUÍNEA, PREPARACIÓN DE EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA Y TINCIÓN DE ROMANOWSKY
OBJETIVOS:.
1. Aplicar las técnicas estandarizadas más comunes en la obtención de muestras de sangre periférica con calidad analítica.
2. Realizar correctamente los extendidos de sangre periférica e identificar las tres zonas características en estos
3. Explicar el fundamento dela tinción de Romanowsky
INTRODUCCIÓN:
La sangre es una suspensión, en la que aproximadamente el 55% del volumen total de esta corresponde al plasma y el otro45% de este volumen corresponde a células que se encuentran suspendidas en el plasma.
La obtención de muestras de sangre para los estudios hematológicos requiere de la aplicación de las recomendaciones internacionales de control decalidad, que garanticen la integridad de la muestra.
La punción venosa es uno de los procedimientos más comunes para extraer sangre, ya que posibilita la recolección de sangre venosa para posteriores análisis de laboratorio, se requiere que el paciente esté en condiciones basales (ayuno de 8 horas).
Los sitos para punción venosa son las venas del antebrazo y fosa antecubital; la venabasílica, cefálica y mediana del antebrazo y radial superficial, cubital superficial y mediana de la fosa antecubital.
La obtención de sangre capilar actualmente está limitada a estudios pediátricos, anteriormente era el método ideal de extracción de sangre para realizar frotes sanguíneos, ya que inmediatamente después de la punción se recoge en las laminillas para realizar los extendidos, sin que hayanecesidad del uso de anticoagulantes que puedan alterar la el volumen de la sangre y morfología celular.
Para realizar los extendidos de sangre periférica, se utiliza sangre venosa anticoagulada generalmente con EDTA (ácido etilendiaminotetraacético) preferentemente en su forma seca analizados los extendidos antes de que transcurran 2 horas desde la extracción de sangre, o bien sangrecapilar directamente de la punción al portaobjetos( es lo ideal). Es recomendable que la sangre anticoagulada sea utilizada inmediatamente para impedir alteraciones morfológicas.
El control de calidad en todas las fases del análisis hematológico es indispensable para lograr confiabilidad de los resultados, por lo que se recomienda obtener muestras de sangre con calidad analítica, siguiendo elprotocolo para la toma de muestra que sea apropiada al estudio. La calidad de las extensiones de sangre es indispensable y esto depende del anticoagulante usado, el tipo de sangre (venosa o capilar) con o sin anticoagulante.
La tinción de Wright se fundamenta en la tinción de Romanowsky que consiste en una combinación de azul de metileno y eosina. La acción combinada de estos colorantes produceel efecto de Romanowsky y da una coloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrófilos y una coloración rosada a los eritrocitos. Los componentes principales causantes de este efecto son el azur B (un producto de oxidación del azul de metileno) y la eosina Y. La amplia variación en los colores y sombras observadas con la tinción de Romanowsky permiten distincionessutiles de las características celulares. La naturaleza ácida o básica de las estructuras celulares determina su avidez por los componentes del colorante policromático de Wright.
MATERIAL:
1 gradilla
Tubos de ensaye DE 13 X 100 mm con anticoagulante EDTA (3 por equipo)
1 Pipeta automática de 10 L con 5 puntas amarillas
Lancetas estériles
Portaobjetos limpios y desengrasados (segúnrecomendaciones)
Jeringas o dispositivos para extracción de sangre con tubos al vacío
Torundas
Torniquete o ligadura de 25 a 30 cm de largo
Alcohol al 70%
Gasas suficientes o pañuelos desechables suaves
Etiquetas para identificar al paciente
Contenedor de objetos punzo cortantes
Puente para tinción
Jabón de tocador para lavarse las manos
Detergente líquido para lavado de material de vidrio...