Filtración por membrana

1. GENERALIDADES.

El método de filtración por membrana (FM) se basa en hacer pasar la muestra de agua problema a través de un filtro de membrana microporosa, en cuya superficie quedan retenidoslos microorganismos.

Este método proporciona resultados definitivos en menos tiempo que el método del número mas probable (NMP), tiene mayor grado de precisión, permite el examen de mayoresvolúmenes de muestra y es útil en las aguas habitualmente poco contaminadas.

Permite la filtración de muestras en el campo y el traslado de las membranas al laboratorio en los medios de conservación.

2.METODOLOGÍA.

REACTIVOS / SOLUCIONES.

Sistema MILLIPORE
Medios de cultivo:
m-Endo
Agar sal y manitol
Extracto de glucosa y triptona
Medio selectivo para Pseudomona.
Agar verde brillantePROCEDIMIENTO.

Preparación de las cajas Petri.

Abrir la placa PetriPad Millipore (placas petri estériles cargadas con un cartón absorbente estéril). Abrir una ampolleta de 2 ml del medioadecuado para el microorganismo que se va a identificar (ver tabla 1) y verter sobre el cartón absorbente distribuyéndolo por toda la superficie. Cerrar la caja petri y marcar para su identificación.Filtración de la muestra. (Ver esquema 1)

1.- Pasar la flama del mechero por la superficie del soporte de acero Microfil durante 3 segundos.
2.- Colocar una membrana S-Pak o EZ-Pak estérilsobre el soporte de acero con unas pinzas estériles.
3.- Situar un embudo Microfil estéril sobre el soporte, presionando hasta notar un “click”.
4.- Verter la cantidad de muestra a analizar en el embudoy aplicar vacío para que el líquido se filtre.
5.- Extraer el embudo. Oprimir la leva para elevar la membrana. Con unas pinzas flameadas tomar la membrana del soporte.
Colocar la membrana dentro dela caja Petri previamente preparada, e incubar a las condiciones adecuadas (ver tabla 1).

Esquema 1. Pasos para procesar la muestra.

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Tabla 1....