glucosa

UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A
FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA
BIOQUÍMICA METABOLICA
PRACTICA DE LABORATORIO 3
COLORIMETRIA: LEY DE BEER-LAMBERT

Profesora: ClaraAndrea Rincón C.

OBJETIVOS
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Comprobar experimentalmente la ley de Beer-Lambert
Determinar la concentración de una solución problema de KMnO4
Realizar la curva de calibración y corregirlapor el método de los mínimos cuadrados

INTRODUCCION
La utilización de colorímetros y en general, la espectrofotometría, se basa en la determinación
de un parámetro; la densidad óptica (DO),también llamado absorbancia (A) que esta
directamente relacionada con la concentración de una determinada sustancia en solución y en la
cual el solvente retiene una parte de la luz incidente sobre ladisolución. La ley de Lambert
indica que la proporción de luz incidente absorbida por un medio es independiente de su
intensidad, pero no del espesor de la capa de líquido (l) o (b) de la celda, ni delas
características del medio: Concentración (c) y la absortividad molar (ε O a) de la solución. De
otro lado, la ley de Beer dice que la absorción de la luz es proporcional al número de moléculasdel material absorbente a través de los cuales pasa la luz.
De la combinación de la ley de Lambert con la ley de Beer se desprende que:
DO = ε x C x l

ó A=εxCxb

MATERIALES y REACTIVOS
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Goteros
KMnO4 con una concentración de 10mg/dl
Agua destilada
10 Tubos de ensayo
Gradilla
Espectrofotómetro
Papel milimetrado
Pipeteadores
1 Balón aforado 250ml (para lasolución stock)

PROCEDIMIENTO
A. Preparación de soluciones:
1. Preparar una solución stock de KMnO4 con una concentración de 10mg/dl y realizar
diluciones en serie (mínimo 8), con un rango deconcentración desde 10; 7; 5.60; 4.90;
4.2; 3.5; 2.80; 2.1; 1.75; 1.05; 0.10; 0.35; 0.170mg/dl.

B. Determinación de la longitud de onda de máxima absorbancia:
1. Con una de las diluciones o con...