Guia 2 Instrumental

INFORME DE ANALISIS INSTRUMENTAL

ANALISIS ESPECTRAL DE UNA SUSTANCIA MEDIANTE EVALUACION DEL RANGO LINEAL Y SU RELACION CON LA LONGITUD DE ONDA


PRESENTADO POR:
MEIBEL MELISSA MONTES MENDOZA
STEFANNY PALOMINO LEON
DANA MARCELA SANTOS MONTES
GLORIA STEFANNY SIBAJA LOPEZ
WENDY PATRICIA ESQUIVEL GOMEZ
KATERIN GUERRA BABILONIA
CAMILO ANDRÉS CAMARGO PITALUA


PROFESOR:
JOSE JUAQUIN PINEDOUNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA BACTERIOLOGIA
IV SEMESTRE

INTRODUCCIÓN
La ley de Beer expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de longitud de onda fija) y concentración de un cromóforo en solución.
A = log I/Io = ε·c·l
La absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración, a mayor número de moléculas mayor interacción de la luzcon ellas; también depende de la distancia que recorre la luz por la solución a igual concentración, cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra más moléculas se encontrará; y por último, depende de ε, una constante de proporcionalidad denominada coeficiente de extinción que es específica de cada cromóforo.
Si se mide la absorbancia en función de la concentración de moléculas absorbentesen soluciones patrón, se puede construir una gráfica de la ley de Beer, llamada curva de calibración; las curvas de calibración pueden ser lineales o no lineales. En la mayoría de casos cuando la curva es lineal se aplica la ley de Beer.
La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c altos, ε varía con la concentración, debido a fenómenos de dispersión de la luz,agregación de moléculas, cambios del medio, etc.












OBJETIVOS
Desarrollar conocimientos acerca de la relación entre la cantidad de radiación absorbida por soluciones y la concentración de la sustancia absorbente en dichas soluciones.

Destacar la importancia de una curva de calibración.


Seleccionar la longitud de onda más apropiada para analizar la sustancia absorbente (Dicromato depotasio) empleando la ley de Beer.

Reconocer la aplicación de la curva de Ringbom y curva del patrón externo

















MATERIALES Y REACTIVOS

10 Tubos de ensayo
Frasco lavador
Beaker de 100 mL
Balón de 100 mL
Gradilla
Espectrofotómetro UV
Dicromato de potasio










MARCO TEÓRICO
Leyes de absorción
Cuando un haz de luz de intensidad Io incide sobre una cubeta cuadrada que contiene unasolución coloreada que absorbe luz a una determinada λ, se produce en la solución un proceso de absorción, y el haz de luz que sale después de atravesar la cubeta tiene una intensidad menor, Is
Para evitar interacciones por parte del solvente o de la cubeta y considerar así sólo la absorción del compuesto de interés, hay que hacer una primera medida con una “solución de referencia” o “blanco”, quecontiene todos los posibles compuestos que participan en la lectura, menos el compuesto a medir. Todas las medidas que se hagan a continuación serán referidas a esta medida inicial.
Se define transmitancia a la relación entre la luz incidente y la luz transmitida:
T = Is/Io
Y el porcentaje de transmitancia:
%T =Is/Io . 100

En la práctica se emplea, en lugar del valor de transmitancia, el de absorbancia (A), ya que la relación entre la concentración de una solución y su transmitancia es inversa y logarítmica, mientras que la relación entre la absorbancia y concentración es directamente proporcional.
A = - log Is/Io = - log T = log 1/T = log 100/%T = log 100-logT  A = 2 –log %T
Si representamosgráficamente en un eje de coordenadas la relación entre la absorbancia y concentración y el %T y la concentración observamos que al aumentar la concentración del compuesto absorbente en solución, más luz es absorbida y menos transmitida.
En los aparatos que se usan hoy en día, las lecturas de %T son transformadas en absorbancias y presentadas así al operador, pero no hay que olvidar que la absorbancia...