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Páginas: 32 (7815 palabras)
Publicado: 10 de abril de 2012
Classic Experiment
3.1
Los ejercicios en la vida
de una enzima
La década de 1950, los científicos descubrieron que el ADN tenía el código que permite a las proteínas se sinteticen. No obstante, como una cadena de pliegues de aminoácidos en una proteína totalmente funcional, con la adecuada estructura tridimensional, siendo un misterio. Un mecanismodebe existir para asegurar el correcto plegamiento de la proteína. Pero, ¿dónde comienza esta información? En 1957, Christian Anfinsen publicó la primera evidencia de que la información para el correcto plegamiento se llevó a cabo en la misma proteína.
Background
Las proteínas están formadas por combinaciones de 20 aminoácidos que se pliegan a continuación, en estructuras complejas. Lacadena desdobla aminoácido se llama la estructura primaria. Para tener una actividad biológica, la proteína debe plegarse en adecuadas estructuras secundarias y terciarias. Estas estructuras se mantienen unidas por interacciones químicas entre las cadenas laterales de los aminoácidos, incluyendo los enlaces de hidrógeno, interacciones hidrofóbicas, y, a veces, los enlaces covalentes. ¿Cómo se formanestas estructuras superiores? ha sido durante mucho tiempo un misterio. ¿Tiene el doble de proteínas correctamente, ya que se sintetiza o se requiere la acción de otras proteínas que se pliegan correctamente? ¿Puede doblar correctamente por sí solo de forma espontánea? En la década de 1950, Anfinsen era un bioquímico interesado en el correcto plegamiento de las proteínas. Específicamente, se investiga laformación de puentes disulfuro, que son enlaces covalentes entre las cadenas laterales de cisteína que sirven como una de las anclas principales mantener unida la estructura de las proteínas secretadas. Él creía que la propia proteína contenida toda la información necesaria para el plegamiento de la proteína. Él propuso la "hipótesis de termodinámica", quede claro que la estructura biológicamenteactiva de una proteína fue también el más estable termodinámicamente en condiciones in vitro. En otras palabras, si las condiciones intercelulares podrían ser imitadas en un tubo de ensayo, a continuación, una proteína natural que se pliegan en su conformación activa. Comenzó su trabajo en una enzima secretada, ribonucleasa pancreática bovina, y estudió su capacidad para doblar correctamentefuera de la célula.
The Experiment
Las proteínas realizan una amplia variedad de funciones en la célula .Independientemente de su función, una proteína debe estar plegada adecuadamente para llevar a cabo su función biológica. Para los estudios de plegamiento de proteínas, lo mejor es estudiar una enzima cuya actividad biológica puede controlarse fácilmente mediante la realización de invitro. Anfinsen eligió una pequeña proteína secretada, la enzima ribonucleasa, en el que podía vigilar plegamiento correcto mediante el análisis de su capacidad para catalizar la escisión de ARN.
Ribonucleasa, una proteína secretada, es activo bajo condiciones oxidantes in vitro. La estructura terciaria de la ribonucleasa activo se mantiene unida por cuatro puentes disulfuro. Adición de un agente reductor, lo quereduce el enlace disulfuro entre dos cadenas laterales de cisteína a dos grupos sulfhidrilo libres, pueden interrumpir esta interacción covalente. Desnaturalización completa de la ribonucleasa requiere tratamiento con un agente reductor. Anfinsen supervisó la reducción de la ribonucleasa midiendo el número de grupos sulfhidrilo libres presentes en la proteína.
En el estado oxidado, no haygrupos sulfhidrilo libres en ribonucleasa porque cada residuo de cisteína está implicado en un puente disulfuro. En el estado completamente reducido, por otro lado, ribonucleasa contiene ocho grupos sulfhidrilo libres. Anfinsen aprovecha esta diferencia para evaluar el grado de reducción mediante ensayo espectrofotométrico para valorar el número de grupos sulfhidrilo.
Para estudiar el...
3.1
Los ejercicios en la vida
de una enzima
La década de 1950, los científicos descubrieron que el ADN tenía el código que permite a las proteínas se sinteticen. No obstante, como una cadena de pliegues de aminoácidos en una proteína totalmente funcional, con la adecuada estructura tridimensional, siendo un misterio. Un mecanismodebe existir para asegurar el correcto plegamiento de la proteína. Pero, ¿dónde comienza esta información? En 1957, Christian Anfinsen publicó la primera evidencia de que la información para el correcto plegamiento se llevó a cabo en la misma proteína.
Background
Las proteínas están formadas por combinaciones de 20 aminoácidos que se pliegan a continuación, en estructuras complejas. Lacadena desdobla aminoácido se llama la estructura primaria. Para tener una actividad biológica, la proteína debe plegarse en adecuadas estructuras secundarias y terciarias. Estas estructuras se mantienen unidas por interacciones químicas entre las cadenas laterales de los aminoácidos, incluyendo los enlaces de hidrógeno, interacciones hidrofóbicas, y, a veces, los enlaces covalentes. ¿Cómo se formanestas estructuras superiores? ha sido durante mucho tiempo un misterio. ¿Tiene el doble de proteínas correctamente, ya que se sintetiza o se requiere la acción de otras proteínas que se pliegan correctamente? ¿Puede doblar correctamente por sí solo de forma espontánea? En la década de 1950, Anfinsen era un bioquímico interesado en el correcto plegamiento de las proteínas. Específicamente, se investiga laformación de puentes disulfuro, que son enlaces covalentes entre las cadenas laterales de cisteína que sirven como una de las anclas principales mantener unida la estructura de las proteínas secretadas. Él creía que la propia proteína contenida toda la información necesaria para el plegamiento de la proteína. Él propuso la "hipótesis de termodinámica", quede claro que la estructura biológicamenteactiva de una proteína fue también el más estable termodinámicamente en condiciones in vitro. En otras palabras, si las condiciones intercelulares podrían ser imitadas en un tubo de ensayo, a continuación, una proteína natural que se pliegan en su conformación activa. Comenzó su trabajo en una enzima secretada, ribonucleasa pancreática bovina, y estudió su capacidad para doblar correctamentefuera de la célula.
The Experiment
Las proteínas realizan una amplia variedad de funciones en la célula .Independientemente de su función, una proteína debe estar plegada adecuadamente para llevar a cabo su función biológica. Para los estudios de plegamiento de proteínas, lo mejor es estudiar una enzima cuya actividad biológica puede controlarse fácilmente mediante la realización de invitro. Anfinsen eligió una pequeña proteína secretada, la enzima ribonucleasa, en el que podía vigilar plegamiento correcto mediante el análisis de su capacidad para catalizar la escisión de ARN.
Ribonucleasa, una proteína secretada, es activo bajo condiciones oxidantes in vitro. La estructura terciaria de la ribonucleasa activo se mantiene unida por cuatro puentes disulfuro. Adición de un agente reductor, lo quereduce el enlace disulfuro entre dos cadenas laterales de cisteína a dos grupos sulfhidrilo libres, pueden interrumpir esta interacción covalente. Desnaturalización completa de la ribonucleasa requiere tratamiento con un agente reductor. Anfinsen supervisó la reducción de la ribonucleasa midiendo el número de grupos sulfhidrilo libres presentes en la proteína.
En el estado oxidado, no haygrupos sulfhidrilo libres en ribonucleasa porque cada residuo de cisteína está implicado en un puente disulfuro. En el estado completamente reducido, por otro lado, ribonucleasa contiene ocho grupos sulfhidrilo libres. Anfinsen aprovecha esta diferencia para evaluar el grado de reducción mediante ensayo espectrofotométrico para valorar el número de grupos sulfhidrilo.
Para estudiar el...
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