hematologia


Técnicas espectroscópicas.

Las regiones ultravioleta y visible del espectro electromagnético se emplean para el análisis cualitativo y cuantificativo de un gran número de sustancias en los medios biológicos. Las técnicas espectroscópicas utilizan la medida de los efectos que produce la interacción de las radiaciones electromagnéticas con la materia. Así, puede medirse la radiaciónabsorbida, emitida, transmitida, dispersada o reflejada de acuerdo con los diferentes métodos.

Técnicas espectroscópicas:

Las principales técnicas espectroscópicas que se utilizan en los laboratorios clínicos son la espectroscopia de absorción molecular para la determinación de sustratos y enzimas, la espectroscopia atómica para la medida de la concentración de metales, la espectroscopia defluorescencia y la espectroscopia de luminiscencia para la medida de diversos compuestos químicos y actividades enzimáticas, y la espectroscopia de dispersión para determinar fundamentalmente proteínas específicas.

Espectroscopia de absorción molecular:

Las regiones del espectro electromagnético más utilizadas en el trabajo analítico de rutina en los laboratorios clínicos son la ultravioleta y lavisible. El término luz se aplica a la región radiante con longitudes de onda visibles para el ojo humano y las longitudes de onda que la rodean. La absorción de la luz por las moléculas biológicas depende de la estructura electrónica de los átomos de carbono que las componen.

Espectrofotómetro:
Los espectrofotómetros son los instrumentos que se utilizan para medir la absorción de la luz por lasdisoluciones. Los principales componentes de un espectrofotómetro de un solo haz son la fuente de luz, el sistema de selección de la longitud de onda, la cubeta para el espécimen, el detector de luz y el dispositivo de lectura. Los espectrofotómetros de doble haz dividen el rayo luminoso en dos haces, uno que pasa por la cubeta de referencia (blanco) y otro que pasa por la del espécimen. La señalque incide sobre el detector es la diferencia (espécimen-referencia). El rayo luminoso se divide por medio de un espejo giratorio que hace incidir el mismo haz, alternativamente, por la cubeta con la referencia y por la cubeta con el espécimen. El detector de luz de los espectrofotómetros convierte la que le llega en energía eléctrica. Los detectores más utilizados para medir la intensidad de laluz en las regiones ultravioleta y visible son los tubos fotomultiplicadores y los dispositivos de estado sólido.

Espectroscopia atómica:

En contraste con las moléculas que producen espectros de bandas, los átomos producen espectros de líneas definidos con claridad. En general, y a diferencia de la espectroscopia molecular, las concentraciones de átomos no se miden directamente en ladisolución, sino que hay que volatilizarlos, lo cual puede hacerse con una llama o electrotérmicamente en un horno. En este estado, los elementos emiten o absorben fácilmente radiación monocromática a la longitud de onda adecuada. La luz emitida o absorbida es proporcional al número de átomos. La emisión de luz se mide por espectroscopia de emisión atómica, y la absorción de la luz, por espectroscopia deabsorción atómica.

Espectroscopia de emisión atómica:
Espectroscopia de emisión atómica mide la luz emitida por los átomos cuando reciben energía calorífica. Hay dos tipos de técnicas de espectroscopia de emisión atómica: la emisión por llama y la emisión por plasma.

Espectroscopia de emisión atómica por llama: La espectroscopia de emisión por llama se denomina también fotometría de llama.Se basa en la emisión de luz característica por los átomos de muchos elementos metálicos cuando se les suministra energía con una llama. El sodio produce luz amarilla (589 nm); el calcio rojo amarillenta (622 nm); el litio roja (760 nm); y el potasio violeta/66 nm). En condiciones controladas, la intensidad de la luz de la longitud de onda característica producida por cada uno de los átomos es...