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ratones transgénicos

Descripción.- Son RMGs portadores de un transgén (material genético externo) integrado al azar en su genoma. Son generalmente modelos de ganancia de función: conducen a laexpresión de un nuevo gen o a la sobre-expresión de un gen ya existente. En este tipo de modelos se puede controlar con total precisión la estructura del "transgén" pero no la posición del genoma enéste que se integra. Generalmente se utilizan construcciones transgénicas compuestas por un promotor eucariótico y la secuencia codificante del gen de interés para expresar dicho gen, osobreexpresarlo, en todas las células del ratón (expresión ubicua) o en un tejido concreto (expresión tejido-específica) (Figura 1). Transgenes de mayor tamaño clonados en cromosomas artificiales de bacteria (BACs)o de levadura (YACs) normalmente incluyen todas las secuencias reguladoras de la expresión del gen de interés y en general son menos sensibles a efectos posicionales reproduciendo más fielmente elpatrón de expresión deseado. Los sistemas de expresión condicional permiten, además, controlar la expresión del transgén en el tiempo. El sistema más utilizado en el ratón es el regulado por tetraciclinaque tiene dos modalidades: tet-ON (la expresión del transgén sólo ocurre cuando se administra doxiciclina al ratón en el agua de bebida) o tet-OFF (la doxiciclina impide la expresión del transgén).Tecnología.- La técnica más utilizada para la generación de ratones transgénicos es la microinyección del ADN transgénico directamente en uno de los dos pronúcleos del embrión de una célula (cigoto)(Figura 1). Normalmente el ADN se integra en el genoma del 5-30% de los cigotos inyectados.

Aplicaciones.- Los modelos transgénicos han sido ampliamente utilizados para la identificación y elestudio de secuencias reguladoras de la expresión génica en construcciones transgénicas en que estas secuencias se fusionan a una molécula fácil de detectar (lacZ o EGFP) dirigiendo su expresión. La...