histologia

Preparación de muestras histológicas

FIJACION

Fundamentos
Producir el cese de la actividad biológica
Remplazar las débiles uniones intermoleculares por otras más estables preservando lasestructuras y componentes químicos de las células
Proveer al tejido de la consistencia óptima para su manipulación
En algunos casos otorgar contraste

Características del fijador ideal
Capacidadpara bloquear de inmediato la autolisis
Efecto microbicida
No provocar distorsiones en la arquitectura
Inducción de cambios en la composición tisular que
favorezcan inclusión, corte y coloraciónTipos de fijación
Histológica: Conservación de estructura
Histoquímica: Preservación de composición química

Por perfusión
Por inmersión

Química
Física


Químicos
Estables
Técnica simpleNo requieren equipamiento especial
No son caros
Se puede conservar el material en fijador
Pueden ser coagulantes o no aditivos (etanol, acetona)
No coagulantes o aditivos (formol,glutaraldehído, OsO4)

PARAFORMALDEÍDO O FORMOL
El más pequeño (CH2O)
Precipita las proteínas fijándose al los grupos aminos.
Ácidos grasos insaturados (doble enlace etilénico)
Se puede asociar a otrosfijadores
Rápida penetración, fijación lenta
Es reversible (crosslink debil)
No provee electrodensidad
Dilución 10 % (4%)

DIALDEHÍDO GLUTÁRICO O GLUTARALDEHÍDO
Estabiliza las proteínas sin alterar laestructura terciaria.
Actúa solo sobre los fosfolípidos con un grupo amino libre.
Penetración lenta.
Irreversible
Inactiva algunas enzimas y antígenos.
No provee electrodensidad.
Principalfijador para microscopía electrónica.
Dilución 1 al 8%

Tetróxido de Osmio (OsO4)
Penetración muy lenta
Potente oxidante (inactiva enzimas y Ag)
Soluble en medio polar y no polar (hidrofóbicos ehidrofílicos)
Produce electrodensidad
Actúa sobre lípidos insaturados
Muy tóxico
El volumen del líquido debe superar 20 veces el tamaño de la muestra
Dilución 1%

Alcohol etílico 95%
Gran...