Huanglongbing de los citricos

MATERIALES Y METODOS
Poblacion de Referencia: Plantas enfermas infectadas por una bacteria llamada Candidatus liberibacter spp., previo monitoreo, preospeccion y muestreos de fincas de productores y empresas de productores citrícolas, y posteriormente analizadas en el laboratorio con PCR convencional y QPCR (convencional) realizadas por el Servicio Nacional de Calidad y Sanidad Vegetal y deSemillas (SENAVE),de acuerdo a la implementación del Plan de Emergencia Fitosanitaria para el Huanglongbing de los cítricos (HLB), declarada en fecha 31 de enero de 2013, a través de la resolución Nº 95/13 en todo el territorio nacional.
La muestra:
Las plantas enfermas que fueron intervenidas por técnicos especializados en identificar los síntomas del HLB, que conforman el comité de emergenciafitosanitaria, las cuales se clasificaron de acuerdo a los siguientes criterios:
Criterios de Inclusion:
Materiales Vegetales y Hospederos, que constituyan una potencial fuente de inoculación de la enfermedad y dispercion de la misma en los departamentos de alto riesgo como asi son:
Distrito de Mbaracajú. Dpto. Alto Parana.
Distrito de Naranjito. Dpto. de Itapua.
Distrito de Curuguaty. Dpto. deCordillera.
Distrito de Isla Pucu. Dpto.de Cordillera.
Distrito de Katuete. Dpto. de Canindeyu.
Distrito de Caraguatay. Dpto. de Cordillera.
Distrito de Isla Pucu. Distrito de Cordillera.
Plantines, mudas citricas y pies de injerto que no cumplan con la Resolucion Nº 540/13, “Por la cual se establecen normas especificas para la produccion y comercialización de mudas de cítricos (Citrus Spp.)”de fecha 26 de junio de 2013.
Criterio de Exclusion:
Plantines, mudas cítricas y pies de injerto que estén dentro de los focos de infección delimitados por grupos entrenados que identifiquen los síntomas y conozcan la extensión de los focos, que no estén infectados ni presenten síntomas de la enfermedad.
Criterio de Eliminación:
Plantines que presenten síntomas de la enfermedad, previamenteidentificados por técnicos especializados, y no den resultados positivos de estar contaminados con la bacteria Candidatus Liberibacter spp.
Tamaño de la muestra:
Muestro a nivel Planta
La bacteria tiene una variación en los síntomas que presenta en lo que se refiere a su concentración pudiendo incluso afectar su detectabilidad con técnicas moleculares. Texeiraet al. (2008) menciona que lossíntomas de moteado difuso son las muestras más seguras para la detección de CandidatusLiberibacterspp. ya que contienen en promedio liberibacters por gramo de nervadura central.
El gran problema se presenta en los árboles asintomáticos que ya están infectados y no pueden ser detectados por la baja concentración de la bacteria, incluso por PCR en tiempo real.

Para este trabajo, en cada punto demuestreo se colectaron 2 hojas de cada punto cardinal del dosel del árbol. Es recomendable colectar las hojas a una distancia de 6 cm de la punta de las ramas hacia el interior del dosel del árbol, esto debido a que posiblemente haya mayor concentración de la bacteria hacia el interior del árbol que en la punta de las ramas (SENASICA, 2009).

Estas evaluaciones se realizaron en el tamaño de muestraseleccionado con los métodos de muestreo antes mencionados. En el caso de la incidencia se consideró el número de árboles enfermos en proporción con el total de la muestra de árboles por huerto. Fue necesaria la visualización de todo el dosel del árbol para discernir la presencia de síntomas, ya que estos no tienen un patrón de distribución en el árbol, particularmente en cítricos agrios (Flores-Sánchez et al., 2010). La variable de daño se midió con la metodología generada en el trabajo de gradientes de dispersión del HLB para la Península de Yucatán donde se generó una escala aritmética de 5 clases (0-0%, 1-25%, 2-50%, 3-75% y 4-100%), el porcentaje fue calculado dividiendo el dosel del árbol en 5 secciones por cada punto cardinal (5% por sección). La severidad por árbol fue la...