Identificacion de enterobacterias

IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS

La identificación de enterobacterias es uno de los procedimientos que comúnmente se llevan a cabo en diversos laboratorios de microbiología, debido a que estas son causantes de una gran variedad de infecciones en el humano.
Para la identificación de este amplio grupo se usa un algoritmo de pruebas, dentro de las cuales se encuentran los medios diferencialesdonde es posible evidenciar las reacciones bioquímicas.
Para el efecto de esta práctica llevada a cabo solo nos basamos en las reacciones bioquímicas en los medios TSI, LIA, Citrato, SIM, RM-VP, Urea. Sin embargo cabe resaltar que la identificación inicia a partir del sembrado de la muestra y aislamiento de colonias aisladas así también la posibilidad de ampliar las pruebas mencionadas esfactible.

Mteriales:

Cepas: (Escherichia coli, Enterobacter aerogenes y Proeus mirabilis)

Bateria bioquimica: Agar TSI (triple azúcar hierro), agar LIA (lisina, hierro,agar), UREA, agar CITRATO DE SIMMONS, caldo MR (rojo metilo), caldo VP(voges proskauer), medio SIM (sulfuro, indol, movilidad)

Medios de cultivo: XLD, Mac conkey

Procedimientos:

1.- Inicialmente serecibieron las cepas en agar TSA
2.- se procedió a la sembrar cada cepa en la batería bioquímica según el orden y la forma indicada comenzando primero en el medio citrato, TSI, LIA, SIM, Urea, RM-VP
3.- seguidamente se puso bajo incubación durante 24 horas a 37 Cº.
4.- Para el sembrado de los medios XLD y Mc conkey primero se realizo un pool de las cepas en solución salina.
5.- Se procedió a lasiembra por agotamiento en cada placa a partir del pool.
6.- Finalmente se colocaron las placas en la incubadora por 24 horas a 37 Cº.

Resultados

Después de 24 horas los resultados fueron los siguientes:

Bateria 1:

|Medio |TSI |LIA |Citrato |SIM |Urea |RM-VP |
|lectura |A/A |K/K |Positivo |Motilidad (+) |negativo |RM: (-)|
| |H2S (-) | | |Indol (-) | |VP: (+) |
| |GAS (+++) | | |H2S (-) | | |
|nombre |Enterobacter aerogenes |

TSI: Fermentación de glucosa, lactosa y/o sacarosa (A/A)
Producción de gas: ruptura del medio.
LIA:Descarboxilación de la lisina: (K/K)
Citrato: El indicador de PH es el AZUL DE BROMOTIMOL el cual en presencia de alcalinidad vira al color azul indicando que la prueba es POSITIVA
Urea: El indicador de PH es rojo de fenol, el cual en alcalinidad vira a un color violeta indicando una prueba POSITIVA. Si el color es amarillo indica una prueba NEGATIVA.

SIM No se observar una zona dedesarrollo difuso que parte de la línea de inoculación.
No se evidencia el indol con el reactivo de Kovacs pues no hay desaminacion producción de triptofano
RM-VP La bacteria puede fermentar la glucosa por la VIA BUTILEN GLICOLICA con producción de productos neutros como el ACETIL METIL CARBINOL (ACETOINA), el 2,3 BUTILENGLICOL y el DIACETIL. El producto final más frecuente es el 2,3 BUTILENGLICOL, que es fácilmente oxidado a ACETIL METIL CARBINOL y luego a DI-ACETIL. El VP realmente es una búsqueda de DI-ACETIL, ya que las condiciones de la prueba convierten fácilmente los otros dos componentes en diacetil.
Las 3 sustancias son neutras con el resultado de que PH del medio no baja sensiblemente y por lo tanto la bacteria es MR negativa y VP positiva

Bateria 2:
|Medio|TSI |LIA |Citrato |SIM |Urea |RM |
|nombre |Proteus |

TSI: Fermentación de la glucosa (K/A).
Producción de H2S:ennegrecimiento del medio
LIA Desaminación de la lisina: R/A) rojo/ amarillo
Citrato: El indicador de PH es el AZUL DE BROMOTIMOL el...