Identificación molecular de bacterias

Acta Pediatr Mex 2009;30(3):148-55

Artículo de revisión Identificación molecular de bacterias causales de sepsis neonatal mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
M en C. Héctor Flores-Herrera,* Dr. Rolando Maida-Claros,** Dra. Haydeé Solís-Herrera.*** Dr. Eucario Illescas-Medrano,*** Dr. en C. Francisco Javier Zavala-Díaz de la Serna**** RESUMEN
La sepsis neonatal es unproblema mundial de salud pública que afecta a los recién nacidos. Ocurre en ocho de cada 1,000 nacimientos; sin embargo, el riesgo de morbilidad y mortalidad neonatal es el 50 % de los casos. La sepsis neonatal se expresa por signos y síntomas de un proceso infeccioso y se confirma por un hemocultivo que revela diversas bacterias patógenas. En la población de recién nacidos hay dos tipos clínicos desepsis neonatal: Una con signos y síntomas de infección pero con hemocultivo negativo. Otro en el que no hay síntomas de sepsis pero cuyas manifestaciones se desarrollan días después. Para ambos tipos hay dificultad para dar un tratamiento apropiado en las unidades de cuidados intensivos del recién nacido. El 15 % de los nacimientos a nivel mundial con sospecha clínica y subclínica de sepsis, hanrecibido diferentes esquemas antimicrobianos sin que se haya identificado al agente causal de la infección. Recientemente se han utilizado metodologías moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR polimerase chain reaction) que ha permitido identificar las bacterias responsables de la sepsis neonatal, cuando el hemocultivo fue negativo. El objetivo de esta revisión, es exponer elfundamente básico de la PCR en combinación con la electroforesis en gradientes desnaturalizantes para DNA (DGGE denaturing gradient gel eletrophoresis) lo que permite identificar comunidades bacterianas complejas en un sólo paso. Asimismo, se mostrará el valor de estos recursos como herramienta de diagnóstico clínico en casos con sospecha de sepsis neonatal. Palabras clave: Sepsis neonatal,hemocultivo, reacción en cadena de la polimerasa, unidad ribosomal, electroforesis en gradientes de desnaturalización.

ABSTRACT
Neonatal sepsis is a worldwide public health problem in many newborns. Its incidence is estimated at 8 of 1000 alive births; however the risk of morbility and mortality reaches 50 %. Neonatal sepsis presents with signs and symptoms of infections; its diagnosis is confirmed byblood culture. It may be present in one of two forms: In one group there are no signs or symptoms initially; they appear several days later which hinders and/or delays medical treatment. In another group there are signs and symptoms, while blood cultures are negative. It is estimated that 15% of all newborns with neonatal sepsis are treated with a variety of broad-spectrum antibiotics even withoutidentification of a causal agent. Recently, molecular techniques such as the polymerase chain reaction (PCR) and the sequencing by identification of bacteriae associated with the neonatal sepsis. The main goal of this review is to present the basis of the PCR in combination with the denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and the sequencing in cases suspected of the sepsis neonatal. Keywords: Neonatal sepsis, blood culture, polymerase chain reaction, subunit ribosomal, denaturing gradient gel electroforesis.

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a sepsis neonatal, es una patología infrecuente de recién nacidos. Su prevalencia a nivel mundial se ha estimado menor al 1.0 % del total de los nacimientos. Sin embargo, los riesgos

de morbilidad y mortandad neonatal alcanzan hasta el 50 % de los casos porinfección. Su identificación oportuna es un desafío para los servicios de neonatología de todo el mundo. 1 En países en vías de desarrollo la incidencia
de la Torre de Investigación. México DF. Tel. 55209900 ext. 478 Fax. (+0015255) 55209705 correo electrónico: floresh8@yahoo.com Recibido: octubre, 2008. Aceptado: marzo, 2009. Este artículo debe citarse como: Flores HH, Maida CR, Solís HH, Illescas...