in situ

Páginas: 4 (852 palabras) Publicado: 26 de agosto de 2013
FISH: FISH. 
→ fluorescent in situ hybridization
fluorescence in situ hybridization: hibridación in situ con sondas fluorescentes. 
Técnica basada en la utilización de sondas de ADN para detectar(y, a veces, cuantificar) genes o secuencias nucleotídicas específicas y localizar dichos genes o secuencias en cromosomas metafásicos o núcleos en interfase. En este caso, la sonda (ADN o ARN) semarca por conjugación química directa con un fluorocromo (fluorescent dye), usualmente de la clase de las cumarinas, fluoresceínas, rodaminas o cianinas, o bien por conjugación química con una moléculano fluorescible, como la biotina o un hapteno (p. ej.: la digoxigenina o el dinitrofenol), capaz a su vez de unirse posteriormente a una segunda molécula marcada con un fluorocromo, como la avidina,en el caso de la biotina, o a un anticuerpo específico, en el caso del hapteno. Tras la hibridación y los lavados respectivos, la sonda se irradia, el fluorocromo emite luz de una determinada longitudde onda (y por consiguiente de un determinado color) y ello permite distinguir la secuencia complementaria como una mancha de color vivo al microscopio de fluorescencia (rojo en el ejemplo de lafigura 3). La hibridación in situ con sondas fluorescentes resulta muy útil en el diagnóstico de síndromes ocasionados por microdeleciones y para detectar reordenamientos o fusiones génicas en célulascancerosas. Existen muchas variantes de este protocolo básico, conocidas genéricamente en inglés con el nombre de FISH techniques, que en citogenética se utilizan para identificar segmentos cromosómicos,correlacionar estructuras cromosómicas con locus génicos, revelar anomalías que no pueden detectarse con las técnicas de bandeo convencionales y analizar y describir reordenamientos cromosómicoscomplejos.
Observación: la sigla española «HISF» apenas se utiliza para referirse a este método. Por este motivo, hemos mantenido la sigla inglesa (FISH).
fluorescent dye: colorante fluorescente....
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