Informe de laboratorio de biologia celular

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  • Publicado : 6 de junio de 2011
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LABORATORIO
Como hipótesis para el desarrollo del informe se plantea la siguiente pregunta: ¿Porque el PH de la azida de sodio tiende a mantenerse constante?

Una posible respuesta radica en que el bombeo de protones disminuye debido a la presencia de la azida de sodio, ya que esta evita el flujo de protones de la matriz mitocondrial hacia el espacio inter membrana.

RESULTADOS:
Tabla 1,0SOLUCIONES REALIZADAS DURANTE LA PRÁCTICA |
SUSTANCIA | SOL. DE CONTROL ml | SOL. DE DNPml | SOL. DE AZIDAml |
Suspensión de levadura al 20% | 5 | 5 | 5 |
Agua destilada | 40 | 40 | 40 |
Solución de DNP 40 mM | | 0.2 | |
Solución de Azida de sodio | | | 0.5 |

A continuación se muestran los resultados obtenidos con respecto al PH de las soluciones y el tiempo transcurrido sobrelos cambios del mismo en cada solución. La primera tabla muestra los valores de PH de cada solución tomados en tres tiempos. Estos datos determinarán la línea basal de cada solución.

Tabla 1,1
TIEMPO EN MIN | VALORES DE PH |
| SOL. DE CONTROL | SOL. DE DNP | SOL. DE AZIDA |
0 min | 4.98 | 5.04 | 5.46 |
3 min | 5.10 | 5.11 | 5.42 |
6 min | 5.12 | 5.17 | 5.18 |
Promedio | 5.06 |5.11 | 5.35 |

Después de dejar reposar durante 5 minutos y agregar 5 ml de solución de glucosa al 10% se registraron los siguientes datos:

TIEMPO | VALORES DE PH |
| SOL. DE CONTROL + GLUCOSA | SOL. DE DNP + GLUCOSA | SOL. DE AZIDA + GLUCOSA |
5 min | 4.64 | 4.70 | 5.35 |
10 min | 4.42 | 4.44 | 5.25 |
15 min | 4.05 | 4.24 | 5.20 |
25 min | 3.96 | 4.02 | 5.17 |
35 min | 3.80 |3.99 | 5.11 |
Promedio | 4.17 | 4.27 | 5.21 |
Las gráficas que relacionan los cambios en el PH con respecto al tiempo se presentan a continuación. Con las gráficas siguientes se determina el comportamiento de las diferentes soluciones en su estado inicial y después de agregarle glucosa.

Gráfica 1,0 solución de levadura en su estado inicial y después de agregarle glucosa

Gráfica 1.1solución de levadura con DNP inicial y solución de levadura con DNP más glucosa

Gráfica 1,3 solución inicial de levadura y Azida con solución de levadura y Azida más glucosa.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

1. ¿cómo es el comportamiento del PH en presencia de DNP como desacoplante y explique cómo opera este compuesto?

Según los resultados obtenidos durante la práctica, inicialmente la soluciónde DNP con levadura y agua destilada se encontraba con un PH promedio de 5.2 unidades, el cuál corresponde a un valor que se encuentra por debajo del punto neutro de PH el cuál se halla en 7 unidades, lo que indica que su comportamiento correspondió a una solución ácida, es decir la cantidad de protones se encuentran en exceso. Sin embargo si se observan los valores iniciales de la solución delevadura sin DNP se observa que el promedio de PH es levemente menor (5,06 unidades). Este aumento en el PH sucede debido a que el dinitrofenol o DNP bloquea la síntesis de ATP o adenosin trifosfato, al tiempo que permite que continúe la respiración. Este compuesto tiene la capacidad de aislar el flujo de electrones y el bombeo de protones en la síntesis de ATP. Al actuar como un ácido lipofílicodébil se asocia con protones del exterior de la mitocondria pasando a través de la membrana con la ayuda de protones y deshaciéndose de él en el interior de la mitocondria. Este agente desacoplante no genera ATP debido a que los protones no regresan a la matriz mitocondrial a través de de la ATP sintetasa causando una tasa de respiración máxima.

2. ¿en qué se diferencia el mecanismo deacción de la azida de sodio de la forma como opera el DNP?

A pesar que ambas sustancias son consideradas como venenos celulares, la azida de sodio funciona como un inhibidor, del cito cromo de la mitocondria, es decir bloquean el propio sistema de transporte. Al contrario de lo que sucede con el dinitrofenol, el cual inhibe la producción de ATP durante el flujo continuo de electrones, la Azida de...
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