Informe laboratorio biología de microorganismos

Pontificia Universidad Católica de Chile
Facultad de Ciencias Biológicas
Departamento de Genética Molecular y Microbiología
Biología de microorganismos BIO151E-2

Trabajo práctico 1: procedimientos
básicos, morfología bacteriana,
microbiota normal, ambiental y
patógena.

Nombre:
Curso: Biología de microorganismos, BIO151E-2
Fecha: jueves 27 de septiembre de 2012

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IntroducciónLos microorganismos son organismos microscópicos constituidos por una célula o varias,
los cuales son estudiados por la microbiología (1). Debido al reducido tamaño que estos
presentan, muchos de hechos requieren de elementos y/o técnicas especiales para poder ser
observados, y por ende, estudiados.
El microscopio es uno de los elementos tecnológicos más utilizado para la observación de
losmicroorganismos, siendo el microscopio óptico quien permite observa células intactas (2). No
obstante, algunos microorganismos requieren de tinciones para poder ser observados, de esta
forma se aumenta su contraste y se facilita su observación (3).
Las tinciones requieren de usos de colorantes frecuentemente catiónicos, pues los
elementos del interior como del exterior celular suelen ser decarga negativa (3), logrando una
óptima adhesión entre colorante-organismo.
Las tinciones pueden ser simples o diferenciales. Dentro de estas últimas se encuentra la
tinción de Gram, donde las bacterias pueden ser Gram positivas, de color morado, o Gram
negativas, de color rosado-rojo (3).
Otro tipo de tinción corresponde a las tinciones de cápsula y de esporas. La primera, es
utilizada enbacterias que posee una capa rígida que impide la entra de los colorantes (e. g. tinta
china) (4), mientras que la segunda, se utiliza en bacterias que estas teñidas por algún colorante y
este no es capaz de penetrar regiones dentro de ellas (5), es decir, se observan regiones sin
tinción.
Los microorganismos estudiados requieren de un ambiente óptimo para desarrollarse y
proliferar, con el finde obtener una cantidad considerable de ellos para realizar las pruebas que se
necesiten. Con este propósito, se presentan los medios de cultivo, que contiene nutrientes que
permiten el crecimiento microbiano (6).
Existen diversas clasificaciones y tipos de medios de cultivo (e. g. tipos de nutrientes,
estado de agregación del medio, etc.), pero cabe destacar los tres tipos de agaresutilizados
principalmente en esta actividad: corriente o nutriente, sangre y McConkey. El primero de ellos se
caracteriza por ser un medio básico para el cultivo de muchos tipos de bacterias ( 7). El agar sangre
contiene dos componentes fundamentales: un medio basal (e. g. soja tríptica, infusión de cerebrocorazón, base de Brucella), y sangre (de oveja, caballo o conejo) y es utilizado para obtenerbacterias y hongos con exigencia nutricional (7) (8). El último tipo de agar mencionado, es un
medio selectivo y diferencial, selectivo para las bacterias Gram negativas y diferencial para las
especies que fermentan la lactosa (8).
Mediante los distintos medios de cultivo se puede realizar lo que se conoce como batería
bioquímica convencional, la cual consiste en un conjunto de reacciones queson medidas en cada
uno de los tubos que contiene caldos (de consistencia líquida) o agares de cultivos específicos, con
el fin de logran identificar una determinada bacteria u especie bacteriana (9).
Existe una prueba bioquímica más moderna conocida como API 10S, el cual es un sistema
de reconocimiento de Enterobacterias y bacilos Gram negativos, que emplea 11 pruebas
bioquímicas que utilizansustratos deshidratados (10).
Para realizar en las condiciones óptimas los procedimientos y poder (por ejemplo) aislar
una muestra pura (e. g. obtener una colonia), se debe considerar algunos procesos básicos
conocidos como medidas de control de los microorganismos, estos corresponden a:
descontaminación, desinfección y esterilización (11).

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La descontaminación es básicamente la...