kinesiologia

TES DE PATERNIDAD
Amplificado por PCR fragmentos polimórficos de ADN de la madre, del niño y de él o los supuestos padres, y separándolo mediante electroforesis, se puede visualizar una serie desegmentos que tiene el niño que debe compartir con la madre y padre biológicos.
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
a) una solución que contenga moléculas de ADN que contengan la secuencia aamplificar
b) oligonucleótidos (de entre 20 y 30 nucleótidos) que actuarán como cebadores (o primers) uniéndose específicamente a la secuencias colindantes con la secuencia blanco.
c) los cuatrodesoxirribonucleótidos (dNTPs)
d) un buffer de pH en el rango de 7,4 y
e) una ADN polimerasa estable al calor. Cada ciclo de replicación consiste en tres pasos:
a) Separación de las hebras:Desnaturalización de la doble hélice de ADN. Las dos hebras de la molécula de ADN original se separan mediante calentamiento de la solución a 95°C durante 15 segundos.
b) Hibridación de los cebadores: Lasolución se enfría rápidamente a una temperatura entre 50 y 60°C que es generalmente la temperatura a la cual cada cebador se une con una hebra de ADN desapareada. Un cebador hibrida con el extremo 3’de la secuencia blanco en una hebra y el otro cebador hibrida con el extremo 3’ de la secuencia en la hebra complementaria. No se formará nuevamente el ADN doble hebra inicial porque los cebadoresestán presentes en exceso.
c) Síntesis de ADN: A continuación la mezcla se calienta a 72°C. La ADN polimerasa termoestable (Taq polimerasa) que se utiliza proviene de una bacteria termófila (Thermusaquaticus) y su temperatura óptima de acción es alrededor de 70°C. La Taq polimerasa cataliza la elongación de ambos cebadores copiando la secuencia blanco. La Taq polimerasa puede ser activa aún atemperaturas tan extremas como 95°C que es la temperatura del primer paso del ciclo de PCR lo cual permite que se puedan realizar hasta 35 ciclos consecutivos de calentamiento y enfriamiento, sin...