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I. INTRODUCCION
Los métodos utilizados para reconocer las infecciones
por virus humanos pueden clasificarse en DIRECTOS e
INDIRECTOS, según persigan demostrar la presencia
del virus o de alguno de sus constituyentes (antígeno o
genoma viral) o bien la respuesta de anticuerpos
específicos por parte del huésped en el curso de la
infección.
Gran parte de las técnicas utilizadas en eldiagnóstico
clínico se basan en pruebas serológicas que identifican
anticuerpos específicos frente a diversas proteínas
antigénicas. Sin embargo, existen circunstancias en las
cuales son necesarias pruebas que detecten precozmente
la infección viral (tratamientos específicos, medidas
profilácticas, etc.).
En algunas infecciones virales es posible detectar la
presencia de antígenos viralespreviamente al desarrollo
de la seroconversión, siendo esta prueba la única
evidencia de la exposición al virus cuando no existe
aumento de los niveles de anticuerpos circulantes
(pacientes inmunodeprimidos).
Igualmente la detección del genoma viral puede
favorecer la precocidad del diagnóstico viral y su
confirmación. En la última década se han desarrollado
una serie de técnicas para eldiagnóstico viral basadas en
la detección de ácidos nucleicos. De ellas la Reacción en
cadena de la polimerasa (PCR) es la más utilizada.
En el momento actual, la tendencia en el diagnóstico
virológico consiste en emplear nuevas y más sensibles
tecnologías de detección de antígenos y de investigación
de ácidos nucleicos con el propósito de lograr un
diagnóstico viral más rápido. El desarrollo dequimioterapia antiviral efectiva es responsable de esta
tendencia que hace de la identificación rápida, sensible y
específica de los virus, una necesidad.
II. RECOLECCION, TRANSPORTE Y
PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS
Un elemento crucial para realizar el diagnóstico de
laboratorio de un virus, cualquiera sea el método
empleado, es la toma y el procesamiento de una muestra
clínica adecuada.
Eldiagnóstico clínico orientará hacia la prueba
apropiada a realizar, pero además de aquel, se requiere
información epidemiológica, identificación correcta del
paciente, edad de aquel y la fecha de obtención de la
muestra. También resulta útil averiguar si el paciente ha
recibido vacunas virales o terapéutica antiviral en una
fecha reciente. Dado que los antibióticos no tienen efecto
sobre losagentes virales se puede obtener una muestra
para cultivo aún cuando la terapéutica contra las
bacterias ya hubiere comenzado.
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Las mejores muestras por lo general son las que se
obtienen en un estadio temprano de la enfermedad
(dentro de las primeras 72hs), cuando el virus se excreta
en concentraciones relativamente elevadas y todavía no
se ha unido con anticuerpos. Después detranscurridos 7
días habitualmente no vale la pena realizar cultivos
virales cuando se trata de huéspedes
inmunocompetentes. No obstante en huéspedes
inmunocomprometidos y en las infecciones virales
persistentes o crónicas, el virus puede estar presente
durante períodos prolongados.
Las muestras deben obtenerse de forma aséptica si se va
a intentar el aislamiento del virus. El volumen de lamuestra debe ser suficiente como para permitir la
realización de los ensayos apropiados y la conservación,
por ejemplo: en caso de tener que repetir el ensayo en
pruebas adicionales, como PCR.
Las muestras pueden obtenerse a partir de :
Hisopados: Conjuntivales
Genitales
Rectales
Mucosa oral
Lesiones cutáneas
Sangre
Aspirado nasofaríngeo
Lavado bronquioalveolar
Expectoración
Orina
Líquidocefalorraquídeo
Materia fecal
Biopsias
Dado la gran labilidad de los virus, estos deben ser
transportados en un medio de transporte que les provea
estabilidad. Esto se obtiene agregando proteínas como
puede ser la albúmina de bovino o la gelatina. Con el
agregado de antibióticos y antifúngicos se logra prevenir
el sobredesarrollo de la flora bacteriana y fúngica
residente del...
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