laboratorio biomoleculas

AISLAMIENTO DE PROTEINAS POR PUNTO ISOELCTRICO Y PRESIPITACION SALINA

Integrantes: CAROLINA ORDOÑEZ
CLAUDIA GUADIR
FELIPE
YULY CHALPATAR

Estudiantes de VI semestre del programa de ingeniería en producción acuícola de la universidad de Nariño
RESUMEN:
En el área de bioquímica es muy comúnaislar y purificar proteínas para estudiar su composición, su estructura y de ser posible su función.
Con esta práctica se pretende hacer prácticos los conocimientos obtenidos anteriormente en clase en cuanto a la obtención de proteínas a partir de muestras naturales, la practica consiste en aislar las proteínas del huevo y la leche conocidas como ovoalbúmina y caseína respectivamente, para lograr laextracción de la caseína se hace a partir de su punto isoeléctrico, y para la extracción de la ovoalbúmina se hace por precipitación de la clara de huevo por sulfato de amonio.

Las proteínas sometidas a diferentes condiciones de pH pueden alcanzar una carga neta de cero y por lo tanto pueden ser precipitadas, este determinado comportamiento de las proteínas se da gracias a su determinadacomposición de aminoácidos.

Esta práctica tiene como finalidad determinar el método utilizado para la obtención de la caseína y la ovoalbúmina, también determinar cuántos gramos de proteína se obtienen de tantos gramos de muestra.

INTRODUCCION:

Las proteínas son sustancias orgánicas muy complejas presentes en toda la materia viva, por tal razón es tan importante el estudio de estas, paradeterminar su función, estructura y beneficio en el organismo.
La extracción de proteínas comienza siempre con una ruptura celular o lisis, los métodos más utilizados se basan esencialmente en la homogenización de los tejidos y la destrucción de los limites celulares por medio de diferentes procedimientos físicos y/o químicos obteniéndose lo que se denomina extracto crudo, los objetivos para lograresta etapa son maximizar la liberación de las proteínas de interés, evitando la degradación térmica o las alteraciones secundarias por oxidación.
Para la realización de este laboratorio se determino la utilización de leche y clara de huevo como muestras para la extracción de las proteínas caseína y ovoalbúmina.
La leche es un producto de secreción mamaria que se produce en las hembras de losmamíferos, la muestra de leche utilizada para la práctica es proveniente de la vaca, esta es rica en proteínas, tales como las caseínas y las globulinas.
La caseína es una sustancia orgánica nitrogenada, es un sólido blanco-amarillento sin sabor ni olor, insoluble en agua.
La forma de obtener la caseína a partir de una muestra de leche es acidificar la leche hasta pH 4.6, a este pH en fosfato decalcio se disuelve de las micelas de caseínas y se deteriora la estructura micelar, provocando que la caseína se agregue y precipite, luego se vuelve a suspender el precipitado de caseína mediante la adición de hidróxido de sodio hasta aproximadamente pH de 7.0 seguido por secado, este proceso se usa en la fabricación de caseinatos de sodio, los caseinatos se usan principalmente en la fabricaciónde varios alimentos.
Este método para la extracción de caseína se denomina precipitación por punto isoeléctrico, se estudiara a fondo más adelante.
Otra de las muestras elegidas para la realización de esta práctica de laboratorio fue, la clara del huevo, es de extracción fácil e importante en la dieta diaria de cualquier ser humano.
El huevo es un ingrediente habitual en la alimentación delser humano, se caracteriza por su alta densidad nutritiva, la principal proteína presente en huevo es la ovoalbúmina.
La ovoalbúmina es la principal proteína de la clara del huevo es una fosfoglicoproteinas, es decir que su cadena de aminoácidos es lleva enlazados diversos glúcidos, pertenece a la familia proteínica de las serpinas, también inhibe muchas de las enzimas, por lo cual no es...