Laboratorio De Bioqu Mica Celular Y De Los Tejidos Autoguardado




Laboratorio de bioquímica Celular y de los Tejidos


FOTOSINTESIS “CUESTIONARIO”




KARINA TADEO GUADARRAMA





15 – mayo -2015





Objetivos:
Analizar algunos factores que modifican la velocidad de la reacción que es catalizada por la invertasa.
Demostrar la reacción lineal entre la velocidad j de reacción y la concentración de laenzima presente.
Determinar cómo influye el pH i del medio sobre la velocidad de una reacción enzimática y su efecto sobre el carácter iónico de la enzima y el sustrato .
Demostrar que la temperatura afecta las reacciones enzimáticas
Observar el efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de la reacción enzimáticay determinar el Km, Vmax , por métodos conocidos.
MARCO TEORICO
En una reacción catalizada por un enzima la sustancia sobre la que actúa la enzima es conocida como sustrato este se une a una región concreta de la enzima denominada centro activo. Un sitio de unión está formado por los aminoácidos que están en contacto directocon el sustrato. Un sitio catalítico está formado por losaminoácidos directamente implicados en el mecanismo de la reacción.
La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones químicas que son catalizadas por las enzimas. El estudio de la cinética y de la dinámica química de una enzima permite explicar los detalles de su mecanismo catalítico, su papel en el metabolismo, cómo es controlada su actividad en la célula y cómo puede ser inhibida suactividad por fármacos o venenos o potenciada por otro tipo de moléculas. Las enzimas, en su mayoría, proteínas con la capacidad de manipular otras moléculas, denominadas sustratos El proceso fue modelizado por Michaels y Menten y le permitió obtener una ecuación, ecuación de Michaelis-Mente en donde la velocidad de la acción de un enzima es función de la cantidad de sustrato presente, la cantidad deenzima y las características del enzima, la afinidad del enzima por el sustrato y el poder catalítico del enzima: La Km nos da una idea la afinidad que tiene el enzima por su sustrato, cuanto mayor es Km menor es la afinidad (predominan las formas E y S libres), cuanto menor es Km mayor es la afinidad (predomina la forma ES). La sacarosa es un carbohidrato constituido por la condensación de dosmonosacáridos: Fructosa y Glucosa, por lo que es un disacárido. Su nombre
común es azúcar de mesa y es el disacárido con mayor distribución en la
naturaleza.
Algunos azúcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes
oxidantes suaves como el ion Fe3+ o Cu2+

Esta característica radica en la .presencia de un grupo carbonilo libre, el cual es
oxidado y genera un grupo carboxilo. Por lotanto, aquellos azúcares con un grupo
carbonilo libre son llamados azúcares reductores y aquellos en los que el grupo
carbonilo se encuentra combinado en unión glucosúrica se conocen como azúcares
no reductores
La sacarosa rompe enlaces alfa 1-2de la sacarosa dando como productos glucosa
más fructosa (azúcares reductores)
La velocidad de una reacción catalizada por un enzima depende de:

Laconcentración de moléculas de sustrato [S]
La temperatura
La presencia de inhibidores
El pH del medio, que afecta a la conformación (estructura espacial) de la
molécula enzimática












































Resultados
Curva estándar azucares reductores
Muestra
N
V
µmoles
absorbancia
Inicial
0.005 mol
1000mL
5000µmol
0
1
mol
0.05mL
0.125µmol
0.03
2
mol
0.1mL
0.5µmol
0.054
3
mol0.2ml
1µmol
0.187
4
mol
0.4ml
2µmol
0.397
5
mol
0.6ml
3µmol
0.717
6
mol
0.75ml
3.75µmol
0.841

1mL--------------1millon µmoles =
n---------------------x=?




Abs=0.2321 [ ]+0 si x=1 si X=2.5
0.23217821 [ 1 ]=...