Laboratorio

PRACTICA 4
LA DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS

INTRODUCCIÓN
La división celular es el proceso por el cual el material celular se divide entre dos nuevas
células hijas. En los Procariotas es un proceso relativamente sencillo, durante el cual dos
cromosomas hijos se unen a puntos diferentes de la membrana celular. Cuando la membrana
se alarga, los cromosomas se separan. La membrana celular luegose invagina y se forma una
nueva pared celular., completándose la división de las células hijas
En los Eucariotas éste proceso es más complejo, esto debido a la vasta cantidad de material
genético contenido en cromosomas diferentes. Las celulas en división pasan a través de una
secuencia regular de crecimiento y división, conocida como ciclo celular. Podemos resumir el
ciclo celular en elsiguiente esquema:

Figura 1. El ciclo celular- El ciclo celular consiste en una fase G1 durante la cual las moléculas y
estructuras citoplasmáticas aumentan; Una fase S, durante la cual los cromosomas se duplican;
una fase G2 durante la cual comienza la condensación de los cromosomas y el ensamblaje de las
estructuras requeridas para la mitosis y la citocinesis En la mitosis, los cromosomasduplicados son
distribuidos entre los dos núcleos hijos: y la citocinesis, durante la cual el citoplasma se divide
separando a la célula materna en dos células lujas.

OBJETIVOS

1. P reparar placas teñidas con orceina acética para la observación al microscopio de la
división celular,
2. Identificar morfológicamente las características de la interfase y de las fases de la mitosis.
3.Reconocer las diferentes fases de la mitosis en el rneristemo radical de la cebolla (Allium
cepa)

M ATERIALES
C ada estudiante debe traer:
Guantes quirúrgicos
Cuchilla nueva de afeitar
Lamina porta objetos
Laminillas cubre objetos
Una Bayetilla y papel absorbente.
S uministrado por el laboratorio:
Microscopio
Aceite de inmersión
Vidrio Reloj
Solución fijadora: Etanol, ácido acético glacialTubos eppendorf
HCl 1N
Orceina acética diluida
Bulbos de cebolla blanca
Trozos de toallas de papel secante
Papel limpia lentes inmersión
P ROCEDIMIENTO
Los bulbos de cebolla se colocan durante varios días (15 a 20 días) en frascos con agua de la llave
para estimular el crecimiento de las raíces. Esta agua se cambia cada 24 horas o menos. Cuando las
raíces alcanzan una longitud de 2 a 3cm, Se corta e! ápice transversalmente y se coloca en
solución fijadora a 4° hasta su uso en el laborato rio (Este proceso se les adelantará en el salón de
C
preparaciones para tener listo tejidos para el día de su práctica)

1. Saque las raíces de la solución fijadora (etanol y .ácido acético glacial) y enjuáguelas con
abundante agua destilada. Remueva suavemente el exceso de agua con unatoalla de papel
absorbente.
2. Pase las raíces a un tubo eppendorf y agregue HCI 1N hasta cubrirlas completamente.

3. Incube los tubos con las raíces a 37° por 20 mi nutos.
C
4. Saque las raíces de la solución acida y enjuáguelas con agua destilada. Remueva
s uavemente el exceso de agua con una toalla de papel absorbente.
5. Transfiera las raíces a un portaobjetos y corte el tejido nomeristemático. Córteles el ápice de
crecimiento a aproximadamente 3 mm. del extremo y elimine el resto.
6. Agregue una gota de colorante de orceína sobre las raíces cortadas y píquelas cuidadosamente
con la cuchilla. Deje actuar el colorante por unos 10 minutos.
7. Cubra la preparación con el cubreobjetos y realice la disgregación y el aplastamiento de los tejidos.
8. Observe al microscopiocomenzando con el objetivo de menor aumento. Ubique las zonas que
m uestran figuras mitóticas. Reconozca las células que están en interfase y las que están en
l as diferentes etapas de la mitosis y realice los correspondientes esquemas.
9. Utilice el objetivo de mayor aumento (100X) pero recuerde que debe agregar previamente una
gota de aceite de inmersión.
10.Después de usar el objetivo 100X,...