LBS medio de cultivo

MATERIALES Y MÉTODOS
Reactivos BD LBS Agar (Lactobacillus Selection Agar)

Cultivo de lactobacilos
Las muestras se tomaron de 2 productos lácteos fermentados: Yakult1 y. Se realizaron 5diluciones seriadas decimalmente como se muestra en la figura 1, a continuación se inocularon en cajas Petri con medio de cultivo LBS y se incubaron a 37°C durante 24 horas.


Figura 1: Diagrama deldesarrollo de cultivo de lactobacilos
Aislamiento de lactobacilos
Se examinaron las colonias crecidas y se procedió a su aislamiento, inoculando 5 cajas Petri, por medio del método de estriado que sedescribe a continuación.
Método de estriado:
Se flameó el asa y se tocó una zona estéril de la caja para garantizar que estuviera fría y lista para rayar.
Tomando con el asa bacteriológica la muestraelegida, se rayó el área 1, de la forma indicada en la figura 2, con líneas discontinuas.
Nuevamente se desinfectó el asa y se repitió el procedimiento de rayado en todas las áreas para cada una delas colonias identificadas.
Las cajas inoculadas se incubaron por 24 horas a 37°C.

Figura 2. Descripción de la técnica de estriado para obtener colonias aisladas.
Tinción de Gram
Aguadestilada
Solución Alcohol:acetona
Solución cristal Violeta
Solución iodica de Gram
Solución de Safranina
Alcohol absoluto
Una vez que se desarrollaron las colonias se realizó una tinción de Gram lacual consistió de los siguientes pasos:

Se colocó una gota de agua en un portaobjetos y se tomó una asada de la cepa de lactobacilos, se homogenizó la muestra, se dejó secar la muestra y después sefijó el frotis, pasando el portaobjetos por la flama del mechero.
Posteriormente se añadieron gotas de cristal violeta y se dejó incubar durante 1 minuto. Se quitó el exceso por decantación.
Seagregó la solución iodica de Gram y se incubó. Se quitó el exceso por decantación.
Se adicionaron gotas de la solución alcohol:acetona (1:1). Se dejó 5 segundos y se quitó el exceso por decantación....