Ley De Beer

1.- OBJETIVOS:

* Graficar las curvas espectrales y determinar los máximos de absorción
* Determinar la longitud de onda de máxima absorción
* Graficar la correspondiente curva de calibración
Determinar la cantidad de la correspondiente sustancia absorbente ( analito)


2.- MARCO TEÓRICO:

2.1.- Introducción

Un método espectrofotométrico está basado en la medida directade la absorción de radiación electromagnética por parte de una muestra, cuantificable a través de la Absorbancia, y la correlación de esta variable con la concentración de la especie de interés en dicha muestra.
Todo analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas longitudes de onda
características de la radiación electromagnética. En este proceso, la radiación es transferidatemporalmente a la molécula y, como consecuencia, disminuye la intensidad de la radiación . Dicha disminución, debida a la absorción experimentada por el analito, puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes, siendo la Absorbancia , A , la más comúnmente utilizada en la espectrofotometría de UV-VIS. Dicha absorbancia se define por la expresión:

donde A es la Absorbancia, P0 la potencia del hazde radiación incidente y P la potencia de dicho haz tras atravesar la muestra.

2.2.- Ley de Beer
De acuerdo con la ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la concentración de la especie absorbente, c, y con la longitud de la trayectoria de la radiación en el medio absorbente o camino óptico, b. Esto es:

donde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad.Cuando la concentración c se expresa en moles por litro, y b en centímetros, la constante de proporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el símbolo e, y, puesto que la absorbancia es una magnitud adimensional, tendrá unidades de L cm-1 mol-1. En este caso, la ley de Beer adquiere la forma:

2.3.- Transmitancía y Absorbancia

Cuando un rayo de luz de una determinadalongitud de onda de intensidad Io incide perpendicularmente sobre una disolución de un compuesto químico que absorbe luz o cromóforo, el compuesto absorberá una parte de la radiación incidente (Ia) y dejará pasar el resto (It), de forma que se cumple: Io = Ia + It

La transmitancia (T) de una sustancia en solución es la relación entre la cantidad de luz transmitida que llega al detector unavez que ha atravesado la muestra, It, y la cantidad de luz que incidió sobre ella, Io, y se representa normalmente en tanto por ciento:
% T = It/Io x 100
La transmitancia nos da una medida física de la relación de intensidad incidente y transmitida al pasar por la muestra. La relación entre %T y la concentración no es lineal, pero asume una relación logarítmica inversa.

La absorbancia (A) esun concepto más relacionado con la muestra puesto que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T, en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io.
Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del 100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y entonces A vale log 1 = 0.La cantidad de luz absorbida dependerá de la distancia que atraviesa la luz a través de la solución del cromóforo y de la concentración de éste.

2.4.- Espectros de absorción
Un espectro de absorción es una representación gráfica de la absorbancia de un analito (o de otra magnitud equivalente) en función de la longitud de onda de la radiación , l ,
(o de otro parámetro relacionadocon la energía de la radiación utilizada). El máximo de absorbancia obtenido en el espectro de absorción de un analito, nos dará la longitud de onda que proporciona la mayor sensibilidad posible, y por tanto será la que se utilizará en el análisis espectrofotométrico de dicho
analito. Todas las disoluciones que presentan color, absorben radiación electromagnética perteneciente al espectro...