Lic En Biología

UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA
Departamento Académico de Ciencias Morfológ icas

GUÍA DE PRÁCTICAS DE HISTOLOGÍA

2do. Año de Medicina
LIMA-PERÚ
2009

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HISTOLOGÍA GENERAL
CAPÍTULO 1
T ÉCNICA HISTOLÓGICA
Se entiende por técnica histoló gica el conjunto de proced imientos para el estudio
microscópico de las células, tejidos u órganos.
El estudio de las células, tejidos uórganos, puede hacerse "in vivo" y "postmortem".
1.- ESTUDIO "IN VIVO"
Consiste en la observación microscópica de ele mentos vivos. Puede hacerse utilizando o no la coloración vital.
1.1.- Estudio "in vivo" sin coloración vital.Se realiza, por ejemplo, colocando una gotita de sangre recién extraída e ntre
porta y cubreobjetos. Se observará las células sanguíneas: gló bulos rojos y glóbulosblancos (en éstos últimos se distinguen mitocondrias).
En el estudio de elementos vivos y tejidos sin colorear, se utiliza el microsc opio de contraste de fase.
1.2.- Estudio "in vivo" con coloración vital.La coloración vital consiste en el empleo de ciertos colorantes no tóxicos (verde Jano, rojo neutro, azul de trypan, etc.) que actúan respetando la vida de la célula.
El estudio "in vivo" puedeser intravital y supravital.
C OLORACIÓN INTRAVITAL.- Consiste en la inyección de colorantes vitales en el ani mal
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vivo. Ejm. Para estudiar los histiocitos se inyecta a un animal (conejo o rata) por vía
intraperitoneal o endovenosa una solución al 1% de azul de trypan (colo ide electronegativo). Luego de la tercera inyección (4 cm3 c/2 días) se sacrifica al
animal, tomándose muestras dediferentes órganos (hígado, bazo, médula
ósea, ganglios, pulmones, peritoneo, etc.). En los co rtes histológicos se observan
unos elementos de color azul: son los histiocitos que han incorporado a su cito plasma
la sustancia inyectada, cuando el animal estuvo vivo.
C OLORACIÓN SUPRAVITAL.- Consiste en poner células libres de organi smos superiores (espermatozoides, leucocitos, etc.) o trocitosde tejidos de un animal
recientemente sacrificado en contacto con colorantes vitales.

Ej. : Coloque una gota de sangre recién extraída y añada una gota de solución verde

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-3de Jano; cubra con una laminilla (cubreobjetos). Se observará en el citoplasma de los
leucocitos las mitocondrias teñidas de color verde.
2.- EXAMEN "POST-MORTEM"
Este procedimiento de estudio histológico requierela muerte previa del ser vivo. D iversos son los métodos de estudio, aquí sólo se anotará el de mayor uso en los lab oratorios. Comprende:
Fijación,
Corte
Coloración.

2.1.- Fijación:
La fijación consiste en someter al citoplasma a la acción de los fijad ores.
Los órganos seccionados en pequeñas porciones (5mm) son sumergidos en el líquido fijador.
La fijación puede durar minutos, horas odías; varía con relación al fijador empleado y
al tamaño de las piezas. Transcurrido el tiempo de fijación, se efectúa el lavado de
las piezas en agua1 a fin de eliminar los restos del fijador.
FIJADORES.- Reciben este nombre, diversas sustancias que actuando sobre los prót idos celulares permiten la estab ilización de sus estructuras. Por lo general los fijad ores son sustancias químicas queactúan precipitando las grandes moléculas prote icas que constituyen la principal parte de los tejidos.
Los fijadores pueden ser simples y los denominados me zclas fijadoras.
Fijadores simples.- Son soluciones acuosas (la mayoría) de una sola sustancia. Se
anotará algunos de ellos:
Formol o formalina.- Es de uso generalizado y permite la mayor parte de estudios de rutina en Histología. Se leemplea en solución al 10, 15 y 20%.
Alcohol metílico.- Muy usado en técnica hematológica.
Alcohol etílico.- Se utiliza el de 95° y el absoluto.
Bicromato de potasio .- Se emplea en solución al 3%.
Las mezclas fijadoras.- Resultan de la asociación de varias sustancias y llevan el
nombre de la persona que hizo la mezcla. Citaremos las de mayor uso:
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Cuando se u tiliza el fijador de...