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¿ Que es una curva de calibración ?
Se trata de una curva de referencia construida con cantidades conocidas deuna sustancia (por ejemplo la albúmina sérica bovina que vimos antes) que seutiliza para determinar la cantidad de esta sustancia (proteínas) presente enuna muestra incógnita.En muchas determinaciones se cumple una relación proporcional entre lamagnitud o intensidad de color que da unareacción y la cantidad del reactivo que la provoca. Por ejemplo: si la presencia de 10 ug de proteínas enuna solución genera la aparición de un color azul pálido cuando es agregada auna mezcla reactiva, la presencia de 20 ug de proteína dará lugar a que lasolución se torne azul más oscuro y así sucesivamente.
Una curva de calibración es un método de química analítica que se usa para determinar laconcentración de una determinada sustancia. Para hacer una curva de calibración, como por ejemplo la absorbancia, algo común para curvas de calibrado y que están hechas en función de la concentración,esto aplica en parte para muestras de concentración conocida de la sustancia que se quiere determinar en la muestra desconocida. Además es una propiedad que varia linealmente con la concentración,por lo tanto midiendo varias muestras de concentración conocida, se puede calcular una función matemática de la recta y luego usarla para calcular la concentración de la muestra desconocida suponiendo un caso de absorbancia.

¿ Que caracteristicas debe cumplir una curva de calibracion ?
· Conocer la composición y naturaleza química de los reactivos que se
manejan.
· Practicar la medida devolúmenes con las micropipetas.
· Saber utilizar un agitatubos.
· Controlar la intensidad de agitación.
· No dirigir el tubo hacia las personas.
· Un espectrofotómetro es un instrumento para medir la transmitancia o
absorbancia de una muestra, en función de la longitud de onda de la radiación
electromagnética. Un espectrofotómetro consta de los siguientes
componentes clave:
· Una fuente quegenera una banda ancha de radiación electromagnética:
Puede ser una lámpara halógena o de volframio que suministra la luz de
la zona visible del espectro (400-700 nm), o de neón, argón o de
hidrógeno, para la zona ultravioleta (200-400 nm).
· Un dispositivo de dispersión que selecciona una longitud de onda
particular de la radiación de la fuente. Comúnmente, se utilizan prismas
y redesholográficas de difracción, que junto a una rendija de entrada y
otra de salida configuran el monocromador.
· Un área de muestra: Célula transparente a la radiación incidente
monocromática que contiene el material bajo estudio disuelto en un
solvente adecuado. Suele ser de 1 cm de espesor.
· Uno o más detectores para medir la intensidad de la radiación:
Normalmente, es un tubofotomultiplicador o un tubo fotodiodo.

¿ Se puede contruir una curva de calibración con sustancias no coloreadas ?

ojo ( no estoy muy segura de esta )

No, porque la correspondiente reaccion química que se realiza es para desarrollar color , y medir asi la intensidad de color de cada solución.
La relación entre intensidad de color y concentración de la sustancia (unamedida de la cantidad de esasustancia) es proporcional y así, si se grafica elvalor de intensidad de color medido con un aparato adecuado(espectrofotómetro o colorímetro) en función de las concentraciones crecientesde la sustancia se obtiene una recta. Es decir, a mayor cantidad de proteína,mayor cantidad de producto de reacción y por lo tanto, mayor intensidad decolor.

¿ Porque razón se eligió una sola longitud de ondapara hacer todas las mediciones de las curvas de absorción ?

Porque para hacer las determinaciones cuantitativas se elige, en general, una longitud de onda correspondiente a un máximo, pues el error de medición es mínimo y la sensibilidad máxima.

¿ Que significado tiene la pendiente de la grafica ?

Si la respuesta a concentración cero de analito no es conocida de antemano, es necesaria...