Método Lowry y Bradford



INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.







Laboratorio de Métodos de Análisis.

Dra. Violeta Larios Serrato.

Elmer Escobar Martínez 4IV1Sec. 4

México D.F. a 29 de Agosto de 2013


Determinación de Proteínas por los Métodos de
Lowry y Bradford

Objetivos
-Elaborar una curva de calibración para la cuantificación deproteínas empleando un método fotométrico, para cada Método.
-Determinar si hay diferencia estadísticamente significativa en la precisión y la exactitud entre los métodos de Bradford y Lowry.
-Conocer elefecto de sustancias no proteínicas en el desarrollo de color.
-Analizar las ventajas y desventajas del método de Lowry, con respecto a otros métodos para la cuantificación de proteínas (Bradford).INTRODUCCIÓN:
Cuantificación de la proteína total:
Los métodos directos de cuantificación de proteínas se basan en algunas características propias de las estructuras proteicas, como lacapacidad de reducir determinados iones, propiedades del enlace peptídico o el contenido de algún aminoácido en particular, a partir de estos datos, se puede deducir la cantidad total de proteína presenteen la muestra.
Entre las técnicas colorimétricas diseñadas para este fin se encuentran:

El Método de Lowry (1951) utiliza tres sistemas para producir coloración por la presencia de proteínas. Enprimer lugar, el Cu+, forma compuestos de coordinación con dos enlaces peptídicos consecutivos de las proteínas, dando lugar a un compuesto coloreado Azul. Por último, el reactivo de Folin-Ciocalteutambién reacciona con los restos tirisonil (residuos de tirosina) de la cadena polipeptídica.
Método de Bradford (1976): Este método se fundamenta en que la unión de las proteínas al colorante azulbrillante de Coomassie G-250 provoca un desplazamiento del máximo de absorción de este compuesto, desde 465 a 595 nm; cuantifica los aminoácidos básicos y aromáticos.

METODO
VENTAJAS
APLICACIONES...