Manual De Procedimientos Lbem-Itm
INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MÉRIDA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA
ENZIMÁTICA Y MICROBIANA
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
Director
Dr. GERARDO RIVERA MUÑOZ
Preparado por:
Silvia Andrea Moreno Mendieta
Mérida, Yucatán, México.
2007
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD
El personal de los laboratorios está expuesto a una serie de riesgos ocupacionales por agentes físicos,químicos y biológicos, los cuales pueden originar accidentes generalmente prevenibles, si se conocen y aplican las medidas de BIOSEGURIDAD. Estas medidas preventivas están destinadas a mantener la vigilancia, para proteger la salud y seguridad del personal. En el laboratorio de Biotecnología Enzimática y Microbiana del ITM, se recomienda:
El manejo adecuado de material de vidrio y equipos(centrífuga, incubadoras, planchas de calentamiento, etc).
El uso de elementos protectores (bata, guantes, tapabocas, gafas, etc).
Evitar comer y/ o maquillarse en el área de trabajo.
Evitar guardar alimentos en los refrigeradores destinados para reactivos o cepas.
Hacer una adecuada disposición de los desechos biológicos y reactivos.
Mantener limpia y despejada el área de trabajo.
Avisaren caso de cualquier emergencia.
PROTOCOLO PARA MANEJO DE MATERIAL Y DISPOSICIÓN DE DESECHOS
I. LAVADO DE MATERIAL
Material que se ha utilizado para la siembra de microorganismos, preparación de inóculos o que esté contaminado:
➢ Dejar 2h en solución de hipoclorito al 0.5-1%.
➢ Descartar esta solución y lavar con abundante agua.
Otro material
➢ Descartar losresiduos de reactivos y dejar correr abundante agua.
➢ Sumergir en detergente, enjuagar con agua corriente varias veces y lavar con agua destilada o desmineralizada.
II. SECADO
➢ Secar el material de vidrio con aire, o en la estufa a T° inferior de 80°C si se requiere.
➢ Secar el material de plástico a temperatura ambiente.
III. ESTERILIZACION
➢ Envolver el material paraesterilizar con papel kraft.
➢ Colocar el material en el autoclave.
➢ Esterilizar 15 a 20 min. A 121°C y 15 Lb de presión.
IV. DISPOSICIÓN DE DESECHOS
➢ Envolver con papel periódico las cajas de petri que han sido previamente esterilizadas antes de tirar a la basura.
➢ Envolver en papel periódico el material de vidrio roto antes de tirar a la basura.
➢ En caso de derrames de algúnmaterial biológico (inóculos, etc), inactivar con hipoclorito de sodio unos 10 minutos antes de lavar con abundante agua.
ELABORACIÓN DE CURVAS ESTÁNDAR
I. CURVA ESTÁNDAR DE N-ACETILGLUCOSAMINA (NAcGlu)
|REACTIVOS |Tubo |NAGlu (g /ml |Solución stock |Agua |
|| | |(ml) |(ml) |
|1) Solución de N-acetilglucosamina en agua a concentraciones |0 |0 |0.0 |1.5 |
|entre 0 y 1000 (g /ml | | | | |
|| | | | |
|2) Reactivo de DNS | | | | |
| |1 |100 |0.1 |1.4 |
| |2|200 |0.2 |1.3 |
|PROCEDIMIENTO |3 |300 |0.3 |1.2 |
| |4 |400 |0.4 |1.1 |
|Se preparan 10 tubos de ensayo como se indica en las columnas |...
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