Medicina

1 UNIVERSIDAD SURCOLOMBIANA FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE MEDICINA DPTO. DE CIENCIAS BASICAS AREA DE MICROBIOLOGIA CURSO DE BACTERIOLOGIA

LABORATORIO No. 1

MORFOLOGIA, FISIOLOGIA Y UBICUIDAD BACTERIANA OBJETIVOS
1. Conocer la morfología microscópica y macroscópica de las bacterias. 2. 3. 4. 5. Identificar algunos de los elementos facultativos de la célula bacteriana, y suimportancia. Identificar algunas características fisiológicas de las bacterias. Conocer el impacto que tienen las bacterias sobre determinados sustratos. Demostrar la presencia de bacterias en algunas sitios anatómicos y en el medio ambiente

CONCEPTOS
Para el desarrollo de esta práctica es indispensable que Usted conozca las Normas de Bioseguridad que se aplican en las prácticas de Laboratoriode Microbiología. Igualmente debe tener claros los conceptos relacionados con las características de la célula Procariota, su relación con el medio ambiente y el papel del Laboratorio como apoyo diagnóstico en las enfermedades infecciosas. A continuación se dan algunas ideas generales respecto a los temas a tratar. La identificación por el laboratorio del germen causal de un proceso infecciosose realiza mediante el conocimiento de varios parámetros: 1. Morfología microscópica 2. Morfología macroscópica 3. Características bioquímicas 4. Reacciones serológicas 5. Patogenicidad animal 6. Susceptibilidad a antibióticos 7. Diagnóstico molecular. La utilidad de cada parámetro, depende del tipo de microorganismo investigado; algunas características del germen hacen que no todos los métodossean aplicables, por ejemplo la ausencia de pared impide la coloración por la técnica convencional de Gram; la incapacidad de crecer in vitro no permite su aislamiento en el laboratorio; o la presencia de Antígenos poco inmunógenos o variables hacen que las pruebas serológicas no sean útiles. En ésta práctica abordaremos los dos primeros parámetros: Morfología Microscópica y MorfologíaMacroscópica. El exámen microscópico de las preparaciones de las muestras biológicas o a partir de cultivos, se hace previo tratamiento de éstas con coloraciones ya sean simples (un solo colorante) o compuestas también denominadas diferenciales (varios colorantes). En algunas ocasiones se utilizan tinciones especiales que permiten observar características como presencia de “cápsula” (tinción negativa continta china), “esporas”

2 (Shaffer Fulton) “flagelos” o “cuerpos de inclusión” (Van Stoltemberg). La coloración usada de rutina, es la COLORACION DE GRAM, en la que se utilizan dos colorantes básicos: Violeta de Genciana que tiñe las GRAM POSITIVAS de azul o violeta, y la fucsina que colorea las GRAM NEGATIVAS de rosado. Estos colorantes básicos se unen a moléculas cargadas negativamente de lassuperficies de la célula bacteriana.

La forma bacteriana (cocos, bacilos o espirilas), la tinción de Gram (Gram Positivo – Gram Negativo), la manera de agruparse (parejas, racimos, cadenas, etc) y la presencia de estructuras facultativas (cápsula, gránulos metacromáticos, esporas) constituyen patrón de identificación.
En el siguiente esquema se observan las formas bacterianas y su agrupación:COCOS

BACILOS

ESPIRILAS

La observación macroscópica se logra con el crecimiento bacteriano obtenido en medios de cultivo que contienen sustancias fundamentales para el metabolismo bacteriano, y a condiciones ambientales adecuadas. Las bacterias se multiplican rápidamente, esto se evidencia en medios líquidos por la turbidez que se produce, y sobre medios sólidos forman masasmacroscópicas visibles a simple vista llamadas COLONIAS.

Idealmente una colonia está compuesta por descendientes de una única célula, la mayoría de las especies bacterianas tardan de 24 a 48 horas en hacerse visibles (rápido crecedoras) otras pueden requerir semanas (lento crecedoras). Las colonias de diversos microorganismos varían en tamaño, forma, color, textura, y grado de adherencia al medio,...