Medios de cultivo
Páginas: 9 (2170 palabras)
Publicado: 1 de diciembre de 2010
Medios de cultivo
FUNDAMENTO:
DISEÑO DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
A la hora de diseñar un medio de cultivo no sólo hay que tener en cuenta los nutrientes sino también las condiciones físicas que permitan el crecimiento de los microorganismos.
1.- Aporte de nutrientes
La cantidad y naturaleza de los nutrientes en un medio de cultivo viene determinada por el rendimiento de un producto enespecial además de los requerimientos nutricionales del microorganismo.
2.- pH
Un microorganismo puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado de las sustancias producidas por el propio microorganismo; por ejemplo:
Utilización de carbohidratos ----> Producción de ácidos orgánicos ----> Acidificación
Catabolismo de proteínas ----> Producción de materiales nitrogenados----> Alcalinización
Estos cambios pueden llegar a ser tan grandes que inhiban el crecimiento del microorganismo. Estos cambios se pueden prevenir controlando el pH mediante sistemas tampón. Uno de los más utilizados en microbiología es la combinación de KH2PO4 y K2HPO4 tamponando el medio a un pH de aproximadamente 6,8.
3.- Necesidades de gases
Los gases principales que afectan aldesarrollo microbiano son el oxígeno y el dióxido de carbono. Las bacterias presentan una respuesta amplia y variable al oxígeno libre clasificándose en cuatro grupos:
i.- Aerobias: bacterias que se desarrollan en presencia de oxígeno libre.
ii.- Anaerobias: bacterias que se desarrollan en ausencia de oxígeno libre.
iii.- Anaerobias facultativas: bacterias que se desarrollan tanto en presencia comoen ausencia de oxígeno libre.
iv.- Microaerófilas: bacterias que crecen en presencia de pequeñas cantidades de oxígeno libre.
Para desarrollar bacterias aerobias se incuban los medios de cultivo en agitación constante o introduciendo aire estéril en el medio.
Los anaerobios estrictos son muy sensibles al O2 por lo que se debe evitar la exposición de estos microorganismos al O2. Se puedeobtener un ambiente de anaerobiosis por los siguientes métodos:
A.- Agregando al medio de cultivo un compuesto reductor, como es el tioglicolato sódico, para disminuir el contenido de O2.
B.- Quitando el O2 por procedimientos mecánicos y reemplazándolo por N2 o CO2.
C.- Mediante reacciones químicas dentro del recipiente que contiene el medio de cultivo inoculado para combinar el oxígeno librecon otro compuesto. Por ejemplo: al encender una vela se transforma el oxígeno en dióxido de carbono.
4.- Suministro de luz
Los organismos fotosintéticos deberán ser expuestos a una fuente de iluminación ya que la luz es su fuente de energía. Esta fuente de iluminación no debe plantear problemas de variación de temperatura, por lo que suelen usarse lámparas fluorescentes con undesprendimiento mínimo de calor.
5.- Control de la temperatura
El desarrollo de las bacterias depende de reacciones químicas, y la velocidad con que se efectúan estas reacciones está influída por la temperatura, por lo que la temperatura puede en parte determinar la velocidad de crecimiento de los microorganismos. Cada especie microbiana posee una temperatura óptima de crecimiento clasificándose segúnesto en los siguientes grupos:
i.- Psicrófilas: capaces de desarrollarse a 0° C o menos. Su temperatura óptima es alrededor de los 15° C.
ii.- Mesófilas: crecen mejor entre 25 y 40° C.
iii.- Termófilas: crecen mejor entre 45 y 60° C.
6.- Otros requerimientos
Halófilas: bacterias que para su crecimiento requieren altas concentraciones de sal (10 - 15%). Son aquellas bacterias aisladasdel mar y ciertos alimentos.
Otras bacterias, como las aisladas en las fosas marinas, requieren presiones superiores a las normales.
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
1.- Estado:
A.- Medios líquidos
B.- Medios sólidos: llevan un agente solidificante (Agar) que es un polisacárido acídico producido por ciertas algas rojas que gelifica por debajo de 45° C. Se usa a una concentración del 1,5%.
C.-...
FUNDAMENTO:
DISEÑO DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
A la hora de diseñar un medio de cultivo no sólo hay que tener en cuenta los nutrientes sino también las condiciones físicas que permitan el crecimiento de los microorganismos.
1.- Aporte de nutrientes
La cantidad y naturaleza de los nutrientes en un medio de cultivo viene determinada por el rendimiento de un producto enespecial además de los requerimientos nutricionales del microorganismo.
2.- pH
Un microorganismo puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado de las sustancias producidas por el propio microorganismo; por ejemplo:
Utilización de carbohidratos ----> Producción de ácidos orgánicos ----> Acidificación
Catabolismo de proteínas ----> Producción de materiales nitrogenados----> Alcalinización
Estos cambios pueden llegar a ser tan grandes que inhiban el crecimiento del microorganismo. Estos cambios se pueden prevenir controlando el pH mediante sistemas tampón. Uno de los más utilizados en microbiología es la combinación de KH2PO4 y K2HPO4 tamponando el medio a un pH de aproximadamente 6,8.
3.- Necesidades de gases
Los gases principales que afectan aldesarrollo microbiano son el oxígeno y el dióxido de carbono. Las bacterias presentan una respuesta amplia y variable al oxígeno libre clasificándose en cuatro grupos:
i.- Aerobias: bacterias que se desarrollan en presencia de oxígeno libre.
ii.- Anaerobias: bacterias que se desarrollan en ausencia de oxígeno libre.
iii.- Anaerobias facultativas: bacterias que se desarrollan tanto en presencia comoen ausencia de oxígeno libre.
iv.- Microaerófilas: bacterias que crecen en presencia de pequeñas cantidades de oxígeno libre.
Para desarrollar bacterias aerobias se incuban los medios de cultivo en agitación constante o introduciendo aire estéril en el medio.
Los anaerobios estrictos son muy sensibles al O2 por lo que se debe evitar la exposición de estos microorganismos al O2. Se puedeobtener un ambiente de anaerobiosis por los siguientes métodos:
A.- Agregando al medio de cultivo un compuesto reductor, como es el tioglicolato sódico, para disminuir el contenido de O2.
B.- Quitando el O2 por procedimientos mecánicos y reemplazándolo por N2 o CO2.
C.- Mediante reacciones químicas dentro del recipiente que contiene el medio de cultivo inoculado para combinar el oxígeno librecon otro compuesto. Por ejemplo: al encender una vela se transforma el oxígeno en dióxido de carbono.
4.- Suministro de luz
Los organismos fotosintéticos deberán ser expuestos a una fuente de iluminación ya que la luz es su fuente de energía. Esta fuente de iluminación no debe plantear problemas de variación de temperatura, por lo que suelen usarse lámparas fluorescentes con undesprendimiento mínimo de calor.
5.- Control de la temperatura
El desarrollo de las bacterias depende de reacciones químicas, y la velocidad con que se efectúan estas reacciones está influída por la temperatura, por lo que la temperatura puede en parte determinar la velocidad de crecimiento de los microorganismos. Cada especie microbiana posee una temperatura óptima de crecimiento clasificándose segúnesto en los siguientes grupos:
i.- Psicrófilas: capaces de desarrollarse a 0° C o menos. Su temperatura óptima es alrededor de los 15° C.
ii.- Mesófilas: crecen mejor entre 25 y 40° C.
iii.- Termófilas: crecen mejor entre 45 y 60° C.
6.- Otros requerimientos
Halófilas: bacterias que para su crecimiento requieren altas concentraciones de sal (10 - 15%). Son aquellas bacterias aisladasdel mar y ciertos alimentos.
Otras bacterias, como las aisladas en las fosas marinas, requieren presiones superiores a las normales.
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
1.- Estado:
A.- Medios líquidos
B.- Medios sólidos: llevan un agente solidificante (Agar) que es un polisacárido acídico producido por ciertas algas rojas que gelifica por debajo de 45° C. Se usa a una concentración del 1,5%.
C.-...
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