Memoria De Prácticas

Universidad de Santiago de Compostela. Facultad de Biología

MEMORIAS DE PRÁCTICAS
FBA III: FISIOLOGÍA ANIMAL
Ánxela Mª Estévez Salguero D.N.I: 76748231Z Grupo 2 14/12/2012

FÓRMULAS
Las fórmulas que se utilizarán para la realización de los cálculos de esta práctica son las siguientes: – – – Molaridad (M)=

gr / Pm V (L)

–

Osmolaridad= M. γ γ= número de partículas en las que sedisocia el sluto cuando está en solución. % → dependiendo de lo que esteamos hablando el % será en masa o en volumen. Por ejemplo: 0,9% salino la relación es peso/ volumen, es decir, hay 0,9 gr en 100 mL de agua total; en cambio, 0,9% metanol la relación es volumen/volumen, 0,9 mL en 100 mL de agua total. C₁ x V₁ = C₂ x V₂ C = concentración del soluto V = volumen La concentración en la fórmula sepuede cambiar por molaridad, porcentaje, etc.

SUEROS ISOTÓNICOS
I.- Si la osmolaridad plasmática es de 0,3 Osmoles/L calcula: A) La cantidad de soluto que habría que pesar para preparar un suero isotónico de glucosa. 0,3 Osm= 0,3 M x 1 = 0,3 M 0,3M =

gr /Pm → 0,3 x 1= L

gr → gr = 54 gramos de glucosa 180

B) La cantidad de NaCl que habría que pesar para preparar un suero de 0,15M 0,15M =Osm = 0,15 x 2 = 0,3 Osm → tiene la misma osmolaridad que el plasma por lo tanto es isotónico. C) La cantidad que habría que pesar para prepara un suero isotónico de Na 2HPO4. Si es isotónico, la osmolaridad será 0,3 Osm. 0,3 Osm = M x 3 → 0,1 M 0,1 M =

gr / Pm → 0,15 = L

gr / 58,5 → gr = 8,775 gramos de NaCl 1

gr /Pm gr /142 → 0,1 M = → gr = 14,2 gramos de Na2HPO4 1 L

II.- Lacomposición de la siguiente solución en mM es:

Calcula la osmolaridad y la cantidad que hay que pesar para prepara el salino fisiológico: mOsm = mM x γ NaCl → mOsm = 100,8 x 2 = 201,6 KCl → mOsm = 3,35 x 2 = 6,7 CaCl2 → mOsm = 2,52 x 3 = 7,56 NaHCO3 → mOsm = 25 x 2 = 50 KH2PO4 → mOsm = 1,11 x 3 = 3,33 MgSO4 → mOsm = 1,17 x 2 = 2,34 glucosa → mOsm = 11,1 x 1 = 11,1 ∑ = 282,63 mOsm Cantidad → mM =mgr: - NaCl → 100,8 x 58,5 = 5896,8 - KCl → 3,35 x 74,6 = 249,91 - CaCl2 → 2,52 x 111 = 279,72 - NaHCO3 → 25 x 84 = 2100 - KH2PO4 → 1,11 x 136 = 150,96 - MgSO4 → 1,17 x 121 = 141,57 - Glucosa → 11,1 x 180 = 1998

mgr /Pm → mgr = mM x L x Pm L

1) Preparar 100 mL de NaCl 0,5M (solución stock) M=

gr / Pm → 0,5 x 0,1 = L

gr → gr = 0,05 x 58,5 = 2,925 gr de NaCl Pm

2) Preparar, a partirde la solución madre, 100 mL de NaCl al 0,9%. 0,9% → P/v → 0,9 mgr en 100 mL M=

0,9/ 58,5 = 0,1538 M 0,1

0,5 M x V1 = 0,1538 M x 0,1 L V1 =

0,1538 x0,1 = 0,03076 L 0,5

III.- Utilizando la ecuación de Henderson-Hasselbach ¿qué cantiades habría que pesar de KH2PO4 (Pm 136,1) y Na2HPO4.2H2O (178) para preparar 100 mL de tampón fosfato 50 mM a pH = 6? (A Tª media = 20 ºC, condiciones delaboratorio, el pK = 7,2) 50mM= mM ácido + mM base → 50 mM = pH = pK + log

mgr /Pm ácido + L

mgr /Pm base L

[Sal] [ácido] [S] [A] [S] [A] [S] [A ]
[S] = 0,063 [A] 50 mM = mM [A] + mM [S] 50 mM = [A] + 0,063 [A] 50 mM = 1,063 [A] [A] =

50 mM = mM [A] + [S] pH = pK + log

pH = pK + log

6 = 7,2 + log

50 = 47,0367 1,063

-1,2 = log

[ S] [A ] [ S] [A ] [S] [A ]
mgr /Pm →47,0367 = L

mM = [A] = 47,0367

log -1,2 =

0,063 =

mM A =

mgr = 47,0367 x 0,1 x 136,1 = 640,16949 mgr de KH2PO4 50 mM = mM A + mM S [S] = 50 - 47,0367 = 2,9633 mM S =

mgr /136,1 0,1

mgr = 2,9633 x 0,1 x 178 = 52,7467 mgr de Na2HPO4.2H2O IV) Considerando una osmolaridad = 0,3, el tampón es isotónico, hipotónico o hipertónico mOsm = mM x γ mOsm = 50 x 6 = 300 mOsm → Osm = 0,3 Esisotónico 3) Preparar 100 mL de Tris-HCl (Pm 121,1) 0,1M a pH = 8 (solución madre)

mgr /Pm → 2,9633 = L

mgr /178 0,1

0,1 M =

gr /121,1 → gr = 1,211 gramos Tris-HCl 0,1

V) Una solución fisiológica para extracción de proteínas (SEP) contiene Tris-HCl como tampón, NaCl para hacerla isotónica, y NP40, un detergente no iónico (y por lo tanto suave), para romper las células. Tris-HCl pH...