Metabolismo de aminoacidos

Metabolismo de carbohidratos, aminoácidos y urea

Las enterobacterias, como su nombre lo indica, son un grupo de bacterias Gram negativas que habitan el tacto intestinal de muchos organismos, incluyendo el de los seres humanos. Todos los tipos de enterobacterias son anaerobios facultativos y poseen requerimientos nutricionales relativamente simples. Pese a que existe una alta homología en cuantoal material genético de muchos de los géneros de esta familia, por cuestiones prácticas se ha decidido separarlos en todos los grupos que existen. Entre los principales géneros tenemos a Escherichia sp., Shigella sp., Salmonella sp., Proteus sp., Enterobacter sp., Citrobacter sp., Klebsiella sp., Yersinia sp. y Serratia sp.
Por lo general, la mayoría de bacterias entéricas son microorganismospatógenos tanto para animales, el ser humano y plantas. Es por ello que el estudio detallado y el aislamiento de cada uno de los géneros de esta familia son de vital importancia para el área de la medicina. Existen también enterobacterias con importancia industrial, de las cuales podemos destacar a la bacteria más estudiada y utilizada en muchos de los procesos: Escherichia coli.
Dada la necesidad deidentificar rápidamente a los distintos géneros de esta familia de bacterias, sobre todo por su patogenicidad, es necesario recurrir a las diferencias en la maquinaria bioquímica de cada uno de los microorganismos, dicho de otro modo, a las diferencias en el metabolismo de las bacterias. Para ello, se cuentan con pruebas bioquímicas que nos permiten identificar, sin dejar lugar a dudas, el génerode bacteria entérica con el cual uno se enfrenta. En la actualidad incluso existen “kits” de identificación rápida para llevar a cabo este proceso.
Las pruebas que realizamos en este experimento a diferentes géneros de enterobacterias fueron la de la capacidad de utilizar citrato, la capacidad de descarboxilar lisina, la capacidad de fermentar lactato, la capacidad de producir H2S, la capacidadde producir CO2 y fermentar glucosa, la capacidad de degradar triptófano, la capacidad de degradar úrea y la capacidad de reducir nitratos.
Materiales y Métodos
Materiales
* Medios de cultivo: Agar Kliger, Agar Citrato de Simmon’s, Agar Lisina, Caldo Urea, Caldo Indol y Caldo Nitraro.
* Asa de Kölle
* Mechero
* Cultivo de microorganismos (Enterobacterias) de 18 - 24 horas.Procedimiento
* En agar Lisina y agar Kliger (Agar inclinado):
* Utilizando la aguja de Kölle sembrar el microorganismo por picadura profunda y luego de haber realizado esto, sin tomar más inóculo, realizar una estría en zigzag en la superficie del medio.

* En agar Citrato de Simmon’s (Agar inclinado):
* Utilizando el asa de Kölle, sembrar el microorganismo realizando una estría enforma de zigzag por toda la superficie del medio.

* En caldo Indol, caldo Nitrato y caldo Urea:
* Utilizando el asa de Kölle inocular los medios con el microorganismo.

* Incubar todos los tubos por 24 horas a una temperatura de 37°C. Observar y reportar los resultados.
Siembra por picadura profunda.
Tabla N°1 Posibles Reacciones
Prueba | Reacción |
Agar Kliger | Fermentación deLactosa: * (-) El medio permanece del mismo color. * (+) El medio vira a un color amarillo.Liberación de CO2: * (-) El medio permanece sin cambios. * (+) Rotura y/o elevación del medio.Producción de H2S: * (-) El medio permanece del mismo color. * (+) El medio se ennegrece.Fermentación de Glucosa: * (-) El medio permanece del mismo color. * (+) La base del medio se torna color amarillo.|
Agar Lisina | Descarboxilación de Lisina: * (-) El medio mantiene su color. * (+) El medio intensifica su color.Liberación de CO2: * (-) El medio permanece sin cambios. * (+) Rotura y/o elevación del medio.Desaminación de Lisina: * (-) El medio mantiene su color. * (+) El medio vira a un color rojo.Fermentación de Glucosa: * (-) El medio permanece del mismo color. * (+) La...