Metotrexato

Páginas: 7 (1695 palabras) Publicado: 18 de febrero de 2014
• USO PROVISTO: Para la determinación cuantitativa de trazas de metotrexato y/o otros metabolitos en orina humana, sangre y fluidos orales.
• DESCRIPCIÓN: El kit de Metotrexato por ELISA es un kit de un solo paso cualitativo diseñado para su uso como un dispositivo de detección para la detección de drogas y sus metabolitos. El kit ha sido diseñado para el propósito de investigación y estádestinado sólo para uso forense. Se recomienda que todas las muestras sospechosas ser confirmadas por un método cuantitativo tales como espectrometría masa cromatografía de gases.
• PRINCIPIO DEL ENSAYO: Kit de prueba de Neogen Corporation opera sobre la base de la competencia entre la droga o sus metabolitos en la muestra y el conjugado de fármaco-enzima para un número limitado de sitios de unión deanticuerpos. En primer lugar, se añade la muestra o el control de la microplaca. A continuación, se añade el conjugado enzima-fármaco diluido y la mezcla se incubó a temperatura ambiente. Durante esta incubación, la placa se lava 3 veces para eliminar cualquier muestra no unido o conjugado enzima-fármaco. La presencia de la envolvente conjugado enzima-fármaco es reconocido por la adición desustrato K-azul (TMB). Después de una incubación de 30 minutos sustrato, la reacción se detiene con la adición de solución de parada roja. El ensayo puede ser leído visualmente o con un lector de microplacas equipado con un filtro de 650 nm. El grado de desarrollo de color es inversamente proporcional a la cantidad de fármaco en la muestra o control. En otras palabras, la ausencia de la droga en lamuestra dará lugar a un color azul / púrpura oscuro, mientras que la presencia de la droga se traducirá en rosa claro a ningún desarrollo de color.
• ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD: Este kit se puede utilizar hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando se almacena en refrigeración a 4 ° C. El almacenamiento puede ser congelado si no se utiliza dentro de los 10 días. Nota: algunos juegosrequieren controles que se almacenan congelados inmediatamente después de recibirla. Ver la etiqueta del kit de referencia para más detalles.
• MATERIALES PROPORCIONADOS:
1. Tampón EIA: 40 ml (listo para usar) solución salina tamponada con fosfato con suero bovino y un conservante. Proporcionada para la dilución de enzima fármaco concentrado de conjugado y las muestras.
2. Tampón de lavadoconcentrado (10x): 20 ml de fosfato de solución salina tamponada con un surfactante. Diluir 10 veces con agua des-ionizada o ultrapura antes de su uso.
3. Sustrato K-blue: 20 mL (listo para usar). Estabilizado 3, 3 ', 5, 5' tetrametilbencidina (TMB) más peróxido de hidrógeno (H2O2) en una sola botella. Se utiliza para desarrollar el color en los pocillos después del lavado. Sensible a la luz.
4.Droga-conjugado enzimático: 200 µl. Drogas de rábano picante concentrado. Diluir 180X antes de su uso.
5. Placa recubierta con anticuerpos: placa con 96 pozos, en 8 tiras con pozos rompibles, recubiertas con antisuero anti-drogas. Los pozos están listos para su uso inmediato. No lavar.
6. Solución de parada roja: 20 mL (listo para usar). Reactivo no ácida utilizada para detener la reacciónenzimática.
7. Cualitativo QC Control Positivo: 750 µl proporcionado (orina humana sintética). No diluya.
8. Cualitativo QC Control Negativo: 750 µl proporcionado (orina humana sintética). No diluya.
• MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS
1. Agua des-ionizada
2. Pipetas
3. Cilindro graduado para diluir y mezclar tampón de lavado
4. Plato de cubierta de plástico para cubrir los pozos durantela incubación.
5. Tubos de vidrio limpios para la dilución de la droga-enzima conjugada.
6. Lector de microplacas con filtro de 650 nm si la solución de para roja es usada, o filtro de 450 nm si es usado para parar la reacción Ac. Clorhídrico 1N
7. Agitador de microplacas
• PRECAUCIONES
1. No utilice ningún reactivo si la fecha de caducidad esta vencida.
2. No mezcle conjugados y placas...
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