Micologia

INSTRUCCIONES DE USO – MEDIOS EN PLACA LISTOS PARA USAR
PA-254032.06 Rev.: Sep 2011

BD Mueller Hinton II Agar  BD Mueller Hinton II Agar 150 mm  BD Mueller Hinton II Agar, Square
USO PREVISTO
BD Mueller Hinton II Agar, disponible en diversos formatos de placa y tamaños de paquete, se utiliza en el procedimiento de difusión en disco estandarizado para la determinación de la sensibilidadde organismos aerobios de rápido crecimiento ante agentes antimicrobianos.

PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO
Método microbiológico. Dado que los laboratorios de microbiología clínica utilizaban a principio de los años 60 una amplia variedad de procedimientos para la determinación de la sensibilidad de bacterias a los antibióticos y agentes quimioterapéuticos, Bauer, Kirby y otrosdesarrollaron un procedimiento estandarizado en el que se seleccionó como medio de prueba el agar Mueller Hinton, un medio originalmente diseñado para el aislamiento de gonococos1-4. Un estudio colectivo internacional posterior confirmó el valor del agar Mueller Hinton para este propósito debido a su reproducibilidad relativamente buena del medio, la simplicidad de su fórmula y la riqueza de losdatos experimentales que se habían acumulado utilizando este medio5. El CLSI ha redactado una norma de rendimiento para el procedimiento Bauer-Kirby, documento que debe consultarse para obtener detalles6. Se han desarrollado otras normas nacionales para las pruebas de sensibilidad antimicrobianas según el procedimiento BauerKirby. En dichas normas, las densidades de inóculo, el método de inoculación,los tamaños de las zonas resultantes y el modo de interpretación pueden ser diferentes de la norma CLSI. Mientras no existan normas comunes europeas para las pruebas de sensibilidad, se deben consultar las normas locales nacionales si no son aplicables las directrices de CLSI. El procedimiento Bauer-Kirby se basa en la difusión en un gel de agar de sustancias antimicrobianas que se impregnan endiscos de papel7. En comparación con los métodos anteriores, que utilizaban discos con concentraciones altas y bajas de agentes antimicrobianos, y que basaban su interpretación en la presencia o ausencia de zonas de inhibición, este método utiliza discos con una sola concentración de agente antimicrobiano y los diámetros de zona presentan una correlación con las concentraciones mínimasinhibitorias (CMI)1,2,6,7. En el procedimiento de prueba, se extiende una suspensión estandarizada del organismo mediante torundas sobre toda la superficie del medio. Se impregnan discos de papel con cantidades específicas de antibióticos u otros agentes antimicrobianos; luego se colocan sobre la superficie del medio, la placa se incuba y se miden las zonas de inhibición alrededor de cada disco. Ladeterminación de si el organismo es sensible, intermedio o resistente a un agente se realiza al comparar los tamaños de zona obtenidos con aquellos que aparecen en las tablas 2A a 2D en el documento M100 (M2) del CLSI6. Se han identificado diversos factores que afectan las pruebas de sensibilidad de difusión en disco. Se incluyen en esta categoría el medio, la humedad excesiva de la superficie delmedio, la profundidad del agar, la potencia del disco, la concentración de inóculo, el pH y la producción de ß-lactamasa por parte de los organismos de prueba5-8. BD Mueller Hinton II Agar se fabrica para que contenga bajos niveles de timina y timidina9.10 y niveles controlados de calcio y magnesio11-13. Los niveles de timina y timidina de materias primas se determinan utilizando el procedimiento dedifusión en disco con discos de trimetoprima-sulfametoxasol (SXT) y Enterococcus faecalis ATCC 33186 y/o 29212. Los
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niveles de calcio y magnesio se controlan analizando las materias primas y suplementando con fuentes de calcio y/o magnesio según se requiera para producir los diámetros de zona correctos con antibióticos de aminoglucósidos y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853....