Microbiología- Asepsia en el Laboratorio

PRÁCTICA N° 5
MEDIOS DE CULTIVO. SIEMBRA Y AISLAMIENTO. TÉCNICA ASÉPTICA Y TRANSFERENCIA DE MICROORGANISMOS

I. INTRODUCCIÓN
En la naturaleza, los microorganismos viven casi siempre en mezclas. No obstante antes de poder determinar la mayor parte de las características de un microorganismo en particular, este debe ser aislado en un cultivo puro (cultivo de las características de un solotipo de microorganismos). El procedimiento general consiste en usar un medio de cultivo (nutrientes apropiados) y condiciones de incubación (ambientales) que estimulen el crecimiento del organismo que se desea y que reduzcan o afecten el crecimiento de otros organismos. Una vez que el organismo deseado ha aumentado en cantidad con respecto a otros, se purifica de modo que el cultivo contengaorganismos del tipo deseado.
Los microorganismos se cultivan en agua, a la que se han añadido los nutrientes apropiados, dando una solución acuosa que se denomina medio de cultivo. Los nutrientes existentes en el medio de cultivo dan a la célula microbiana todos los ingredientes requeridos para que produzca más células semejantes a ella misma. Además de las fuentes de energía, que pueden ser sustanciasorgánicas e inorgánicas, o luz, el medio de cultivo debe tener fuentes de carbono, nitrógeno y otros macro y micronutrientes importantes para el desarrollo de los microorganismos. Para el aislamiento e identificación de un microorganismo en el laboratorio, es necesario realizar técnicas de siembra de la muestra en un respectivo medio de cultivo. Estás técnicas varían según el estado físico delmedio o de las necesidades gaseosas de los microorganismos (aerobios, anaerobios, etc.). Una condición básica de la siembra es que debe realizarse bajo rigurosas reglas de asepsia, evitando el crecimiento de contaminantes.



MEDIO DE CULTIVO
Conjunto de sustancias esenciales para el crecimiento y desarrollo microbiano.
Un medio de cultivo se refiere a aquel lugar en el espacio en el quese reúnen las características necesarias para el crecimiento y desarrollo, en este caso microbiano. Las sustancias necesarias para el crecimiento de los microorganismo pueden ser proporcionados por un sistema vivo ( in vitro).

Los medios de cultivo se pueden clasificar de la siguiente forma:
De acuerdo a su estado físico:
Sólidos
Líquidos.
Semisólidos.
De acuerdo a sus propiedades sobreel crecimiento y desarrollo microbiano:
Para crecimiento.
Enriquecidos.
Selectivos.
Indicadores o diferenciales
Medios sólidos, contienen aproximadamente 1.5% o más de agar (el cual les confiere la característica de sólidos) se utilizan principalmente para el crecimiento y aislamiento de bacterias.
Medios líquidos, no contienen agar, se conocen también como caldos, se utilizan para elcrecimiento de inóculos puros.
Medios semisólidos, aunque en la naturaleza no existe el estado físico de semisólido, en bacteriología se usa para definir a aquellos medios que contienen agar pero en proporción menos de 1.5% principalmente para estudios de movilidad.
Medios para crecimiento, son los que contienen nutrientes que permiten el desarrollo de la mayoría de los microorganismos no exigentes,con su velocidad de crecimiento normal, y sin ofrecer a ninguna ventaja especial. Eje. Agar nutritivo.
Medios enriquecidos, son los medios a los que se adiciona algunos componentes especiales con lo cual se busca sólo el desarrollo de microorganismos exigentes.
Medios selectivos, son los que se les incorpora un inhibidor del desarrollo bacteriano con lo cual se busca sólo el desarrollo de untipo especial de bacterias.
Medios indicadores, son todos aquellos en los cuales se busca valorar características metabólicas de cada especie de bacteria.

MÉTODOS DE INOCULACIÓN O DE SIEMBRA
INÓCULO
Carga de microorganismos presentes es un sitio y momento determinado.
Una vez conociéndolos medios de cultivo, hay que conocer los métodos de inoculación.



1 Método de estriación o...