Mutagenesis

genética microbiana

INDUCCIóN DE MUTANTES EN Escherichia coli
Grupo: 5QM2 Equipo: 10
Ramos Ponce Lucero Guadalupe Ríos González Roberto Antonio Pérez Meza Rosalba
escuela nacional de ciencias biologicas

Práctica No. 2 INDUCCIóN DE MUTANTESEN Escherichia coli
Objetivos:
* Obtener los conocimientos adecuados para el manejo de técnicas capaces de inducir mutaciones.

* Analizar algunos parámetros para caracterizar el proceso de mutación como la relación dosis – respuesta.

* Caracterizar el daño producido mediante al uso de algunos mutágenos como la luz ultravioleta y la hidroxilamina, mediante pruebas de reversión.Introducción:
Para poder hablar de este tema es necesario conocer algunos conceptos:
Mutación: es un cambio en la secuencia de bases el cual no se debe a una recombinación y es heredable.
Mutante. Es aquel organismo que posee características diferentes a las silvestres.
Mutágeno. Agente ya sea Químico, Físico o Biológico que provoca, mutación.
Frecuencia de mutación: Esta puede serinducida o espontánea
a) Frecuencia de mutación espontanea: 10-7 a 10-10
b) Frecuencia de mutación inducida: 10-4 a 10-7
Revertante: Organismo el cual puede regresar a su estado silvestre tanto fenotípica como genotípicamente o solo una de los dos
Reversión: es una segunda mutación el cual permite regresar a su estado silvestre

Las mutaciones pueden ocurrir espontáneamente o después de lainducción con agentes mutagénicos. Las mutaciones espontáneas pueden ocurrir debido a la acción de las radiaciones naturales e incluso durante la replicación del DNA debido a errores en la lectura de las bases. Estos errores ocurren con una frecuencia de 10-7- 10-10 por pares de bases durante una replicación.
La frecuencia de mutación (la proporción de mutantes en la población) puede aumentarsesignificativamente con el uso de mutágenos. De esta manera puede incrementarse hasta 10-4 - 10-7 en el aislamiento de mejores productores de metabolitos secundarios e incluso hasta 10-2 - 10-1 en el aislamiento de mutantes auxótrofos.
Tanto los mutantes espontáneos como los inducidos se producen como resultado de los siguientes cambios estructurales en el genoma:
· La mutación en el genoma puedecausar cambios en el número de cromosomas.
· La mutación en el cromosoma puede cambiar el orden de los genes dentro del cromosoma.
· La mutación puntual puede resultar de cambios en la secuencia de bases dentro de un gen.
Las mutaciones utilizadas para la mejora de cepas microbianas generalmente son mutaciones puntuales. Estas mutaciones puntuales son de dos tipos:

a). Sustitución de unnucleótido por otro nucleótido.
La sustitución de un nucleótido por otro en un gen puede originar las siguientes mutaciones:
Mutación silenciosa: cuando el codón alterado continúa codificando para el mismo aminoácido y por lo tanto se sintetiza la misma proteína.
Mutación de sentido erróneo: cuando el codón alterado codifica para un aminoácido diferente que puede alterar las propiedades de laproteína, o incluso convertirla en no funcional.
Mutación sin sentido: cuando la sustitución del nucleótido produce un codón de terminación de la cadena resultando en una parada de la síntesis de la proteína en la traducción. El producto es una proteína incompleta que probablemente no es funcional.
b) Mutaciones Por Corrimiento De Lectura
Mutaciones de inserción: cuando se añaden uno o másnucleótidos en un gen.
Mutaciones de deleción: cuando se eliminan uno o más nucleótidos en un gen.
Estos dos tipos de mutación conllevan a la formación de proteínas no funcionales.
Una característica de las mutaciones puntuales es que pueden revertir. Un revertante se define como una cepa en la cual se restaura el fenotipo de la cepa silvestre que se había perdido. Existen dos tipos de...