Métodos directos de recuento de microorganismos

Centro De Bachillerato Tecnológico Industrial Y De Servicios No. 85

Especialidad: Técnico laboratorista químico
Submódulo: Cuantifica Microorganismos con bases a normas (CTIM)
Tema: “Métodos directos de recuento de microorganismos”


Métodos directos de recuento de microorganismos
Fases del crecimiento de un cultivo
     En este apartado vamos a revisar el estudio de la cinética delcrecimiento de microorganismos que crecen en un cultivo realizado en un volumen finito. a esto se le denomina cultivo batch y podríamos traducirlo por cutivo discontinuo por contraposición con el cultivo continuo que desarrollaremos más adelante. El desarrollo de un cultivo discontinuo se ajusta al representado en la siguiente figura:

   Se pueden distinguir cuatro fases en el cultivo: (1)la fase lag en la que el microorganismo se adpata a las nuevas condiciones y pone en marcha su maquinaria metabólica para poder crecer activamente. La duración de esta fase es variable y en general es mayor cuanto más grande sea el cambio en las condiciones en las que se encuentra el microorganismo. (2) La fase exponencial cuya cinética explicamos en la página anterior. (3) La fase estacionaria en la queno hay aumento neto de microorganismos, lo que no significa que no se dividan algunos, sinio que la aparición de nuevos individuos se compensa por la muerte de otros. (4) La fase de muerte en la que el número de microorganismos vivos disminuye de forma exponencial con una constante k que depende de diferentes circunstancias.
     En la fase de mmuerte decimos que el número de microorganismosvivos disminuye exponencialmente. Pero ¿qué es un microorganismo vivo en términos microbiológicos?. Consideramos vivo al microorganismo que puede multipicarse (dividirse), y muerto al que ha perdido irreversiblemente la capacidad de dividirse. Es importante entender este concepto porque los microorganismos microbiológicamente muertos no tienen porqué estar metabólicamente inactivos.
 Medida delcrecimiento microbiano
     Podemos medir el crecimiento microbiano siguiendo diferentes parámetros algunos de los cuales presentaré a continuación. No debemos olvidar que en condiciones de crecimiento equilibrado todos los parámetros del cultivo evolucionan de forma proporcional y, por consiguiente, midiendo uno de ellos (el de medida más fácil) podemos medir el resto.
   En este apartadorevisaremos los principales métodos de recuento de microorganismos. Una información más complñeta puede encontrarse en la conexión     Métodos de recuento.
     Los métodos para el seguimiento de la evoluci´pon de un cultivo microbiano pueden clasificarse en directos e indirectos. Los métodos directos se basan en la medida de la evolución del número de células vivas (técnicas de plaqueo) o del número departículas (técnicas microscópicas y de contadores de partícuas). Ls métodos indirectos se basan en la medida de algún parámetro del cultivo que nos permite deducir información sobre la evolución del número de microorganismos. La elección de un método de seguimiento del cultivo en concreto depende de las características del cultivo y del proceso.
     Entre los métodos principales de recuento demicrorganismos podemos destacar:
1. Las técnicas de recuento microscópico de células sin fijar usando microscopía de contraste de fae. Para ello se cuenta el número de partículas en un volumen determinado usando una célula de Petroff-Hauser o de Neubauer (portaobjetos modificado en e que una rejilla nos permite conocer el volumen que estamos observando). El procedimiento es rápido y sencillo; perono permite distinguir células vivas inmóviles de células muertas.
2. Contaje de partículas utilizando sistemas automáticos del tipo Coulter Counter. La operación de estos sistemas es sencilla (método de empleo) y permite rápidamente determinar el número de patículas presentes en una suspesión y la distribución de sus tamaños. El problema es que no distingue entree células vivas y muertas ni...