NMP colifromes segun 17025

* VALIDACIÓN SECUNDARIA DEL

MÉTODO DE NÚMERO MÁS PROBABLE
Y RECUENTO EN PLACA PROFUNDA
PARA COLIFORMES TOTALES Y
FECALES EN MUESTRAS DE
ALIMENTOS BASADA EN LA NORMA
ISO NTC 17025

Un laboratorio que preste servicios de análisis
microbiológico debe llevar a cabo procedimientos y
métodos que le permitan obtener la acreditación, y así
emitir resultados que puedan generar la confiabilidad yseguridad a sus clientes.

*En

el presente trabajo, se llevó a cabo la
validación de dos métodos de control
microbiológico de alta importancia en el análisis
de alimentos como lo es el Recuento en Placa
Profunda y Número más probable de Coliformes
totales y fecales desarrollados en Biotrends
Laboratorios.

* Para

realizar la validación se llevaron a cabo
pruebas en las que se evaluaron los
parámetrosde repetibilidad y reproducibilidad
de las técnicas, mediante el desarrollo de
estos métodos bajo las mismas condiciones y
bajo condiciones alteradas, variando el tiempo
de análisis y los analistas; la metodología se
llevo acabo en muestras de alimentos con
altos y con bajos recuentos de coliformes
totales y termotolerantes o fecales, ensalada
mixta cruda y arroz cocido respectivamente

*Losresultados
obtenidos
fueron
estudiados mediante el análisis del
coeficiente de variación y mediante la
distribución de Fisher en las que se
aprueba o no hipótesis nula planteada en
cada caso

*Es

un proceso que ofrece evidencia de
que un método es capaz de servir para su
propósito planeado, es decir, para
detectar
o
cuantificar
un
grupo
microbiano o microbio especificado con
adecuada presión yexactitud

*Validación

*Demostración

por experimento que un
método establecido funciona de cuerdo
con las especificaciones en las manos del
usuario

*Validación

secundaria

*Especificidad
*Exactitud o veracidad
*Linealidad
*Precisión
*Repetibilidad
*Reproducibilidad
*Robustez
* Selectividad
*Sensibilidad

*Parámetros de
evaluación

*Coliformes Totales
*Coliformes fecales

* Análisismicrobiológico de

alimentos

*Siembra: Método tradicional para siembra en profundidad
*Medio de Cultivo: VRBL, Agar con sustrato cromogénico
*Recuento: Colonias de coliformes, diámetro mayor o igual

de 0.5 mm, de color rojo violeta dependiendo del medio
de cultivo a utilizar.
* Fundamento: El recuento de coliformes totales y fecales
en alimentos permite evaluar las condiciones higiénicas en
las que seencuentra determinado producto.

*VENTAJAS
Mayor sensibilidad en la recuperación
de células viables.

Rápida, económica y de fácil acceso.

Disponibilidad de medios de cultivo a
utilizar altamente selectivos permite la
recuperación de microorganismos a
partir de muestras heterogéneas.

Permite evaluar células viables y
recuperarlas para identificación precisa
(ICMSF, 2000)

Alto riesgo decontaminación por errores en
manipulación, ambientes, equipos a utilizar, etc.
El total de células presentes en el medio no presentan
una misma tasa de crecimiento por lo que algunas no
pueden ser contadas obteniendo conteos estimados,
arrojando resultados no son exactos (ICMSF, 2000).

*desventajas

*Control de calidad de medios de cultivo
*Control macroscópico
*Control de esterilidad
*Control de pH*Prueba de selectividad y productividad

(método

ecométrico)

*Validación del

método

*Validación del
método

Verificación del método
Dilución y
homogeneización de las
muestras

Siembra en placa profunda
de Coliformes Totales y
termotolerantes

Recuento (NTC 4092)

Análisis estadístico

Validación Secundaria tipo concurrente del método de Recuento
en placa profunda para Coliformes TotalesValidación Secundaria tipo concurrente del
método de Recuento en placa profunda para
Coliformes Fecales

Método alterno de recuento de células viables.
Es de uso fundamental en el recuento de
grupos especiales de microorganismos como el
grupo
de
Coliformes
al
igual
que
microorganismos como S.aureus, Enterococcus
y Clostridium. Es un método basado en
probabilidades estadísticas.

*NÚMERO...