Obtención de emulsina

LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA III
PRÁCTICA # 3: Obtención de emulsina
Objetivos

* Obtener una enzima, la emulsina, a partir de almendras dulces.

* b) Comparar la actividad de laemulsina obtenida, bajo dos diferentes temperaturas por acción sobre el p-nitrofenil-β-D- glucósido.

Diagrama de flujo
Caliente en baño maría durante 10 minutos.
Pesar 20g de almendras, colocarlo enun matraz Erlenmeyer y agregue 1 mL de ácido acético al 1% y someter agitación durante 15 min.
A los 15 minutos suspender agitación y filtrar por gravedad . La disolución filtrada se mantiene enbaño de hielo y le añaden 15 mLde acetona
Mantener la disolución en baño de hielo durante 10 min. y filtrar por gravedad
Tome un poco de la emulsina del papel filtro, coloquela en un frascovial , agregue un mL de agua destilada , agite y agregue 1 mg de p-nitrofenil-β-D-glucósido.
Agite y observe los cambios y el tiempo en que se producen. Agregue una gota de NaOH al 10%.
Obtenciónde emulsina
Comprobación de la actividad enzimática

Resultados
Equipo | Temperatura usada en el tratamiento almendras | Resultados prueba de emulsina |
1 | Temperatura ambiente | Positivo 2min. (Intenso) |
2 | Reflujo | Positivo más de 10 min. (extra tenue) |
3 | Temperatura ambiente | Positivo 2.5 min. (intenso) |
4 | Reflujo | Positivo 6 min. (muy tenue) |
5 | Temperaturaambiente | Positivo 3 min. (intenso) |

Análisis de resultados
En la práctica usamos los residuos de almendras para obtener mediante ellos la emulsina y comprobar su actividad enzimática. Debido a quecada equipo había usados métodos distintos, algunos habían usado para el tratamiento de las almendras el método a temperatura ambiente y otros a reflujo, esto nos permitió hacer una comparación delmétodo utilizado y el resultado de la actividad enzimática. A pesar de que todos los equipos tuvieron una prueba positiva, no todos la obtuvieron en el mismo tiempo y la actividad enzimática de la...