Pr Ctica Cromatografia
Páginas: 7 (1536 palabras)
Publicado: 24 de marzo de 2015
Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores Iztacala
Biomoléculas
Practica 1.
Separación de aminoácidos por cromatografía en papel.
Integrantes:
Carranza Castillo Brenda Berenice______________
Garcia Silva Karla Anahi_______________
Grupo: 2203
Profesores:
Soledad Chino Vargas
Hector Barrera Escorcia
Introducción:
Los aminoácidos son lasunidades constituyentes de las proteínas, biomoléculas estas últimas de interés en las organizaciones estructurales y funcionales de células y tejidos.
La hidrólisis de proteínas por los diferentes métodos (ácida, básica o enzimática) proporciona 20 aminoácidos (alanina, prolina, lisina, ácido aspártico, ácido glutámico, asparagina, glutamina, histidina, glicina, serina, valina, tirosina, triptofano,fenilalanina, treonina, isoleucina, leucina, cisteína, metionina y arginina) como constituyentes universales de las proteínas.
Éstos se distribuyen en esenciales (fenilalanina, leucina, lisina, metionina, isoleucina, treonina, triptófano y valina; aminoácidos esenciales en niños, arginina e histidina) que deben ser suministrados por la dieta, y los no esenciales.
El estudio y caracterización delas distintas biomoléculas (azúcares, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos, etc.) requiere en numerosos casos su aislamiento y purificación a partir de mezclas complejas como son los preparados de cualquier material biológico. Una de las técnicas bioquímicas más clásicas y utilizadas para dicho fin es la cromatografía.
La cromatografía incluye una amplia gama de técnicas, que se pueden clasificaratendiendo al fundamento físico-químico en el que se basa la separación (cromatografía de adsorción, de reparto, de cambio iónico, de filtración molecular, hidrofóbica y de afinidad), o al material sobre el que se lleva a cabo (cromatografía en papel, capa fina, en columna y de gases).
La cromatografía en papel (cromatografía en la que la fase estacionaria es papel), es una técnica en la que seaplica un pequeño volumen de la muestra cerca de uno de los extremos de una hoja de papel filtro. Este tipo de cromatografía puede ser ascendente, entonces el solvente se mueve hacia arriba por capilaridad.
Al realizarse la separación, los solutos de la mezcla original migran a lo largo del papel con diferentes velocidades, dependiendo de la solubilidad en el solvente. La relación de migraciónde una sustancia (Rf) puede expresarse de acuerdo con la siguiente fórmula (Gonzales et al, 2008):
Todas las técnicas intentan explotar las diferencias físicas, químicas y biológicas de las distintas biomoléculas para llevar a cabo su separación y aislamiento.
De forma general, en las técnicas cromatográficas existe una distribución de las moléculas entre dos fases, la fase estacionaria o partedel sistema separador que permanece fija en el espacio, y la fase móvil que circula sobre la fase estacionaria en íntimo contacto con ésta.
Objetivos:
Comparar las propiedades de solubilidad de los diferentes aminoácidos mediante su separación por cromatografía en papel.
Separar e identificar los aminoácidos presentes en un extracto hidrolizado de células vegetales, por medio de lacromatografía en papel.
Hipótesis:
Si todos los aminoácidos reaccionan con ninhidrina, entonces todos los aminoácidos se verán reflejados en el papel.
Resultados y Análisis:
En el corrimiento cromatográfico (figura 1) se observan 19 bandas teñidas de color purpura correspondientes a 19 muestras utilizadas, en las cuales es posible identificar manchas de diferentes tamaños y a diferentes distancias. Las 3ultimas muestras no se observan manchas.
Figura 1 .Al revelar la hoja con el calor el resultado de cada uno de los 20 aminoácidos pueden observarse manchas de diferentes tamaños y distancias recorridas diferentes, lo que permite calcular el Rf de cada una de ellas.
De acuerdo a la relación de migración para los aminoácidos se obtuvieron los valores de Rf para cada uno de ellos...
Facultad de Estudios Superiores Iztacala
Biomoléculas
Practica 1.
Separación de aminoácidos por cromatografía en papel.
Integrantes:
Carranza Castillo Brenda Berenice______________
Garcia Silva Karla Anahi_______________
Grupo: 2203
Profesores:
Soledad Chino Vargas
Hector Barrera Escorcia
Introducción:
Los aminoácidos son lasunidades constituyentes de las proteínas, biomoléculas estas últimas de interés en las organizaciones estructurales y funcionales de células y tejidos.
La hidrólisis de proteínas por los diferentes métodos (ácida, básica o enzimática) proporciona 20 aminoácidos (alanina, prolina, lisina, ácido aspártico, ácido glutámico, asparagina, glutamina, histidina, glicina, serina, valina, tirosina, triptofano,fenilalanina, treonina, isoleucina, leucina, cisteína, metionina y arginina) como constituyentes universales de las proteínas.
Éstos se distribuyen en esenciales (fenilalanina, leucina, lisina, metionina, isoleucina, treonina, triptófano y valina; aminoácidos esenciales en niños, arginina e histidina) que deben ser suministrados por la dieta, y los no esenciales.
El estudio y caracterización delas distintas biomoléculas (azúcares, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos, etc.) requiere en numerosos casos su aislamiento y purificación a partir de mezclas complejas como son los preparados de cualquier material biológico. Una de las técnicas bioquímicas más clásicas y utilizadas para dicho fin es la cromatografía.
La cromatografía incluye una amplia gama de técnicas, que se pueden clasificaratendiendo al fundamento físico-químico en el que se basa la separación (cromatografía de adsorción, de reparto, de cambio iónico, de filtración molecular, hidrofóbica y de afinidad), o al material sobre el que se lleva a cabo (cromatografía en papel, capa fina, en columna y de gases).
La cromatografía en papel (cromatografía en la que la fase estacionaria es papel), es una técnica en la que seaplica un pequeño volumen de la muestra cerca de uno de los extremos de una hoja de papel filtro. Este tipo de cromatografía puede ser ascendente, entonces el solvente se mueve hacia arriba por capilaridad.
Al realizarse la separación, los solutos de la mezcla original migran a lo largo del papel con diferentes velocidades, dependiendo de la solubilidad en el solvente. La relación de migraciónde una sustancia (Rf) puede expresarse de acuerdo con la siguiente fórmula (Gonzales et al, 2008):
Todas las técnicas intentan explotar las diferencias físicas, químicas y biológicas de las distintas biomoléculas para llevar a cabo su separación y aislamiento.
De forma general, en las técnicas cromatográficas existe una distribución de las moléculas entre dos fases, la fase estacionaria o partedel sistema separador que permanece fija en el espacio, y la fase móvil que circula sobre la fase estacionaria en íntimo contacto con ésta.
Objetivos:
Comparar las propiedades de solubilidad de los diferentes aminoácidos mediante su separación por cromatografía en papel.
Separar e identificar los aminoácidos presentes en un extracto hidrolizado de células vegetales, por medio de lacromatografía en papel.
Hipótesis:
Si todos los aminoácidos reaccionan con ninhidrina, entonces todos los aminoácidos se verán reflejados en el papel.
Resultados y Análisis:
En el corrimiento cromatográfico (figura 1) se observan 19 bandas teñidas de color purpura correspondientes a 19 muestras utilizadas, en las cuales es posible identificar manchas de diferentes tamaños y a diferentes distancias. Las 3ultimas muestras no se observan manchas.
Figura 1 .Al revelar la hoja con el calor el resultado de cada uno de los 20 aminoácidos pueden observarse manchas de diferentes tamaños y distancias recorridas diferentes, lo que permite calcular el Rf de cada una de ellas.
De acuerdo a la relación de migración para los aminoácidos se obtuvieron los valores de Rf para cada uno de ellos...
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