Pr ctica micro 4


USO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO PARA OBSERVACIÓN DE MORFOLOGICAS MICROBIANAS Y EFECTOS DE TINCIONES


OBJETIVO:
Conocer la preparación de un frotis de colonias bacterianas y fungicidas, así como distinguir entre una muestra en fresco o fijada al calor. Realizar tinciones de gram para identificación bacteriana y azul de lactofenol para identificación fúngica con ayuda del manejo óptimo delmicroscopio compuesto.

RESULTADOS:
Al inicio de la práctica se conocieron los tiempos que cada colorante debe permanecer en la muestra para realizar adecuadamente la tinción Gram:

Tiempo
Colorante
1 minuto
Cristal Violeta (Violeta de Genciana)
1 minuto
Yodo Lugol (fijador, mordente)
4 segundos
Alcohol- Acetona
1 minuto
Safranina


Primero se preparó un frotis de las muestras de las bacteriasque crecieron desmesuradamente en el medio de cultivo de agar nutritivo (AN) realizado en la práctica anterior, bacterias que crecieron a partir del zapato del profesor Raysulli y las manos del profesor Yamir. En esta muestra las características microscópicas que se pueden observar son cocos y bacilos, estas bacterias fueron teñidas por tinción Gram y este fue el aspecto que reveló.

Figura 1:Bacterias de manos y zapato teñidas con tinción Gram

Posteriormente se tomó muestra del agar dextrosa papa (PDA), el cual contenía el hongo que creció del zapato del profesor Raysulli, la primera vez que se realizó la tinción se hizo de manera incorrecta, ya que se tiño por tinción Gram y se fijó con calor.
La segunda vez que se realizó la tinción, se realizó en fresco con azul lactofenol, losresultados fueron los siguientes:


Figura 2: Hongo de suela de zapato teñido con tinción Gram

Figura 3: Hongo teñido con azul lactofenol

Se obtuvo una muestra de serratia de la caja petri que inoculó el profesor Ramón. Se tiñó por tecnica de tincion Gram y al observar en el microscopio adquirió tonalidades rojizas y forma alargada por lo que se puede inferir que es gram negativa de lafamilia de los bacilos.

figura 4. serratia

Posteriormente se obtuvo una muestra de G.Aureus y se pudo observar la forma circular de los microorganismos y su tonalidad azul, se hizo un análisis y se determinó que se trata de un estafilococos de categoría Gram positiva.


figura 5. G. Aureus

En la muestra de B.Subtilis, se obtuvo como resultado unos bacilos (forma alargada) y se hizo tinción contécnica Gram y se obtuvieron coloraciones rojizas y azules, por lo que es difícil diferenciar si son Gram positivas o Gram negativas

figura.6 B. Subtilis
Hongo del Agar Nutritivo que fue pintado con Tecnica Gram. No se pudo hacer un mayor acercamiento de 40X y no se pudo observar con mas detenimiento. Solose bservó una coloración azul pero nunguna bacteria.


figura 7. Hongo- Tinción Gram

DISCUSIÓNDE RESULTADOS:
Almazán Galindo Elsi I.
Al momento de realizar el frotis del primer agar se hizo el fijado al calor y la tinción gram, pero como era un hongo el resultado que se obtuvo fue el incorrecto
Este procedimiento fue erróneo, ya que los hongos se tiñen en fresco con azul de lactofenol, y no se fijan con calor, ya se que mueren los microorganismos presentes.

Reyes Cortez Mariana
Algunasde las observaciones no fueron las esperadas puesto que algunas muestras que se realizaron de hongos fueron analizadas con tinción de técnica Gram y no se podía realizar un análisis adecuado, como sucedió con la muestra que se inoculo del zapato del profesor Raysuli. En otros casos fue difícil de igual manera apreciar la muestra puesto que habían muchas plastas en el portaobjetos y no se podíandistinguir bien los microorganismos. Por ultimo la muestra de B. Subtilis en un principio debería ser azul con forma alargada, si resultaron bacilos, pero habían tinciones rojizas y azules; Esto se debe a un mal manejo y control del tiempo durante las tinciones.

CONCLUSIONES:
Almazán Galindo Elsi I.

Reyes Cortez Mariana
Se cumplió con el objetivo de la práctica puesto que el equipo aprendió a...