Practica bioquimica

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
{draw:frame} FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
CAMPUS COATZACOALCOS
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA MICROBIANA
PRÁCTICA # 1
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD DEDESHIDROGENASA
INGENIERÍA AMBIENTAL
601
EQUIPO Nº 4
ERENDIRA MÓJICA RODRÍGUEZ
ISRAEL PROTH GUTIÉRREZ
JESÚS EDUARDO JUÁREZ GONZÁLEZ
OBJETIVO
Determinar la actividad microbiana por medio dela actividad de deshidrogenasa en diferentes medios.
FUNDAMENTO
Esta técnica se basa en el uso de una sal soluble en este caso trifeniltetrazolio como aceptor terminal de electrones. Después deincubar las muestras de suelo 24 horas a 37 oC, esta sal es reducida formando formazanos de color rojo, a continuación de la extracción del formazano la concentración es cuantificada por colorimetríauna vez extraído el formazano con un disolvente como metanol o acetona.
PROCEDIMIENTO
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CÁLCULOS
La actividad deshidrogenasa en suelos se expresa como μg TPF/g suelo por día. Losvalores obtenidos de absorbancia en las muestras analizadas son interpolados en la curva de estándares para obtener la concentración del TPF. Los blancos se utilizan con extractos de suelosacetónicos o metanólicos sin TTC o TPF.
AD= 40 [TPF]dwt
Donde:
AD= Actividad deshidrogenasa, en μg TPF/g suelo por día.
[TPF]= Concentración de TPF, en μg/mL.
dwt= Peso del suelo en base seca de1 g de suelo húmedo, en g
40 = Volumen de metanol adicionado a la suspensión.
Valores para realizar la curva de estándares para obtener la concentración del TPF
ACTIVIDADES
Escriba enhoja aparte sus observaciones, cálculos, resultados y conclusiones.
¿Cómo se relaciona la deshidrogenasa con la actividad respiratoria de los microorganismos?
¿Qué otros métodospueden utilizarse para medir la actividad respiratoria?
Escriba en hoja aparte sus observaciones, cálculos, resultados y conclusiones.
¿Cómo se relaciona la deshidrogenasa con la...