Practica de espermatoscopia

Práctica: Espermatobioscopía

Objetivo:
Identificar las características microscópicas y macroscópicas de una muestra de semen.

Introducción:
Un espermatozoide (del griego esperma, semilla, y zoon, animal), es una célula haploide que constituye el gameto masculino, y su función es la formación de un cigoto totipotente al fusionarse su núcleo con el del gameto femenino, fenómeno que darálugar, posteriormente, al embrión y al feto. Semen o esperma es el conjunto de espermatozoides y sustancias fluidas que se producen en el aparato genital masculino de todos los animales, entre ellos la especie humana. El semen es un líquido viscoso y blanquecino que es expulsado a través del pene durante la eyaculación. Está compuesto por espermatozoides (de los testículos) y plasma seminal que seforma por el aporte de los testículos, el epidídimo, las vesículas seminales, la próstata, las glándulas de Cowper, las glándulas de Littre y los vasos deferentes.
La espermatobioscopia, espermograma, espermiograma, espermatograma o seminograma, es el estudio de la calidad de una muestra de esperma. En el se evalúan los aspectos físicos del semen (volumen, pH, mucolisis, viscosidad, color, olor);y los aspectos celulares que estudia el espermatozoide en relación con el numero, movilidad, morfología y vitalidad. También ofrece información valiosa sobre la presencia de otras células como macrófagos, linfocitos, leucocitos, bacterias y hongos.
Material:

Esperma
Probeta graduada especial para esperma
Pipeta de toma para leucocitos
Vaso de precipitado
Porta y cubreobjetos
Microscopio Tiras para medir pH
 Cámara de neubauer 
 Eosina G
Termómetro
Agitador de vidrio

Procedimiento:

Recolección de la muestra:
1. La abstinencia sexual debe ser de 3 a 6 días.
2. Efectuar lavado genital con jabón y abundante agua.
3. Recolectar la muestra por masturbación.
4. Depositarla en un recipiente estéril de polipropileno.
5. Si la muestra es recolectada en el hogar:Entregarla al laboratorio máximo 1 hora después de haberla recolectado.
6. Mantener la muestra lo más cercano a la temperatura corporal

EXAMEN MACROSCOPICO

1. Se realiza el examen macroscópico, observando cada una de las características del semen
2. Se determina el volumen vaciando el contenido en la probeta para esperma
3. Para conocer el pH, se utilizan las tiras reactivas, las cuales sesumergen aproximadamente 30 segundos y se leen comparándolas con la etiqueta del envase.
4. Aspecto:
Observaremos después de la licuefacción.
Color normal: nacarado o gris opalescente.
Color rojizo o marrón (hematíes).
Color amarillento (ictericia, alta vitamina B2) o alta nivel de flavoproteínas oxidadas de vesículas germinales (elevada abstinencia).
5. Viscosidad
Diferenciarlo delicuefacción
Cogeremos una pipeta Pasteur con semen y dejaremos caer su contenido
Valor de referencia: gotas,o se forme un filamento < 2cm. Si fuera mayor, anotaremos viscosidad anormal.
6. Para realizar la viabilidad en otro portaobjetos se coloca una gota de semen y una gota de Eosina G, se coloca el cubreobjetos y se esperan 2 minutos para realizar la observación (los espermatozoides muertos seobservan con la cabeza de un color parecido al naranja). El conteo se realiza también tomando en cuenta 100 células aproximadas y se reporta un porcentaje.
Tipos de motilidad:
Tipo a: movilidad rápida y progresiva, > 25 micrometros/seg a 37ºC, 5 veces la cabeza en 1 segundo.
Tipo b: movilidad progresiva lenta o perezosa
Tipo c: movilidad no progresiva, < 5 micrometros/seg, 1 vez la cabezapor segundo
Tipo d: inmóvil
Valor de referencia (60 minutos):
> 50% de los espermatozoides con movimiento tipo a + b. Ó >25 % con movilidad tipo a. < 50% Astenozoospermia.
7. 10 microlitros. Porta atemperado 37ºC. Se deja estabilizar unos 60 seg. Observamos a 100 aumentos muestra homogénea. A continuación pasamos a 400 X con contraste de fase. Contamos, 1º los móviles tipo a y b, y...