practica

Diagrama de flujo de jamón queso de puerco






















INSTITUTO TECNOLÓGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE ZAMORA









INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS



MICROBIOLOGÍA




PRÁCTICA #3 “TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM Y TINCIONES SELECTIVAS”


4TO. SEM A

ELISA SUSANA CORTES ESTRADA





PRÁCTICA 3
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM YTINCIONES SELECTIVAS

OBJETIVOS:
Que el estudiante clasifique algunas especies bacterianas en Gram positivas o Gram negativas de acuerdo a la tinción de Gram. que observe estructuras bacterianas especiales, como las endoesporas y las cápsulas con tinciones selectivas. Que comprenda la importancia que tienen estas tinciones para ka caracterización e identificación de las bacterias.INTRODUCCIÓN:
La tinción propuesta por el médico danés Chistian Gram en 1884, es una de las tinciones diferenciales más utilizados en bacteriología, que clasifica los cultivos bacterianos de menos de 24 horas en Gram positivas y Gram negativas. El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta decontraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes. Estos pueden emplearse para distinguir entre tipos diferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.
Las células generalmente sontratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas, proceso llamado fijación. Para bacterias, la fijación por el calor es lo más corriente, aunque también puede fijarse con sustancias químicas como formaldehido, ácidos y alcoholes. Después de la fijación, si se añade el colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma. La fijación se realiza habitualmente en célulasque han sido fijadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo inmediatamente el proceso de tinción. La fijación produce habitualmente el encogimiento de las células; la tinción, por el contrario, hace que las células aparezcan mayores que lo que es realmente, de manera que las medidas de las células que han sido fijadas o teñidas no pueden realizarse conmucha precisión.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantescatiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo. Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinancon los materiales lipídicos de la célula, usándose a menudo para revelar la localización de las gotículas o depósítos de grasa. Un ejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudán.

Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina mordiente; un mordiente habitual es elácido tánico. El mordiente se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá atacar el colorante.


MATERIALES:
1 probeta de 100 mL
1 vaso de precipitados de 100mL
1 parrilla de calentamiento
1 mechero
5 Portaobjetos
1 Piceta con agua destilada
Cristal violeta (Anexo 1.3)
Safranina (Anexo 1.8)
Lugol (Anexo 1.5)
Solución de alcohol acetona...