practicas de laboratorio

Practica no. 8
DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
Tubo, suero, Pipeta
Introducción: El ácido úrico es producto
del metabolismo de las purinas, ácidos
nucleicos y nucleoproteínas, valores
elevados indican patologías que afectan
dichos metabolismos, algunas de origen
genético.
Habitualmente
la
concentración del ácido úrico varía de
un individuo a otro de acuerdo a
diversos factores tales como la edad,sexo, dieta, origen étnico, constitución
genética, embarazo, etc.
Fundamento: El ácido úrico es oxidado
por la enzima específica uricasa
generándose alantoína y H2O2, el cual
en
unareacción mediada por la enzima per
oxidasa (POD), reacciona con el ácido
3,5-Dicloro-2-Hidroxi-Bencensulfónico y
4-AAP produciéndose un compuesto
coloreado con un máximo de absorción
a 520nm., en cantidad proporcional ala
cantidad de ácido úrico presente en la
muestra.
Metodología:
1. Condiciones del ensayo: Longitud de
onda: . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490550) Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. .. .1 cm paso de luz Temperatura . . .
37ºC / 15-25ºC 2. Ajustar el
espectrofotómetro a cero frente a agua
destilada.
3. Pipetear en una cubeta:

4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC ó
10min. 15-25ºC.
5. Leer la absorbancia (A) del Patrón y
la muestra, frente al Blanco de reactivo.
El color es estable como mínimo 30
minutos.

Valores
de
referencia:
Varones 3,4 mg/dL – 7,0 mg/dL
Mujeres 2,4 mg/dL – 5,7 mg/dL
Significado clínico: Niveles altos de
ácido úrico son indicativos de patología
renal y generalmente se asocia con la
gota.
Cálculos: (A) Patrón /(A) Muestra x 6
(Conc. Patrón) =mg/dL de ácido úrico
en la muestra
Resultado: 20.73 mg/dL
Bibliografia:
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http://es.scribd.com/doc/359618
1/DETERMINACION-DEACIDO-URICO-ENSUERO#scribd
Aspectos básicos de bioquímica
clínica Escrito por Jacobo Díaz
Portillo,María Teresa Fernández
del Barrio,Fernando Paredes
Salido

Practica No. 1
Depuración de creatinina
Suero, orina, pipeta
Introducción: La creatinina es el
producto final delcatabolismo de la
creatina.
La
cantidad
producida
diariamente está relacionada con la
masa muscular. La creatinina filtra
libremente por el glomérulo (pequeñas
cantidades son reabsorbidas y también
secretadas por los túbulos renales). Su
determinación en suero, así como la
depuración de creatinina endógena
constituyen parámetros importantes
para el diagnóstico de diversas
afecciones renales.Fundamento: La creatinina presente en
la muestra reacciona con el picrato en
medio alcalino originando un complejo
coloreado. Se mide la velocidad de
formación de dicho complejo en
periodos iniciales cortos, evitándose así
la interferencia de otros compuestos.
Metodología:
1.
Coloque
las
celdillas
del
espectrofotómetro a 310 K (37°C)
2. Lleve a cero el espectrofotómetro con
un blanco de agua a 510 nm.3. Pipetee 1 ml del reactivo en cada tubo
y preincube por 3 minutos a 37°C.
4. Transfiera 0.05 ml des estándar en el
tubo, mezcle inmediatamente y pase a
una
celda
de
lectura.
5. Transcurridos exactamente 20 segs.
Lea y registre la absorbancia (A1)
Exactamente 60 segs. Después de la
lectura inicial lea y registre la
absorbancia
final
(A2)
6. Calcule el cambio de absorbancia A
restando
(A2-A1).Valores de referencia:
Hombres y mujeres: 70-100 m/min en
orina de 24 horas
Significado clínico: Los resultados
anormales (depuración de la creatinina
por debajo de lo normal) pueden indicar:







Deshidratación
Isquemia renal (deficiencia
sangre)
Insuficiencia renal aguda
Insuficiencia renal crónica
Enfermedad renal terminal

de

Cálculos:
A2m-A1m/A2st-A1st x 5(20)
Resultado: 1718.58 ml/minBibliografia: Medicina interna, Volumen
1
editado por William N. Kelley

Practica No. 4
Cuantificación de cloro sérico
Suero, cloro, pipeta

Introducción:
El
control
de
la
concentración de iones cloro tiene gran
interés clínico dada su importancia en el
balance ácido-base y la regulación
osmótica del fluido extracelular.
Fundamento: los iones de cloro
reaccionan con el complejo mercurio...