Practicas

Practica nº 1: Determinación de pesticidas mediante HPLC

Fundamento teórico
Se designa con el nombre de cromatografía un grupo de métodos de separación de mezclas complejas aplicable también a ladeterminación de las cantidades de los constituyentes de esta.
Los componentes esenciales de un sistema cromatográfico son: una fase fija estacionaria, constituida generalmente por un sólidogranular finamente dividido, contenido por regla general, dentro de un tubo columna; una fase móvil, que puede ser un gas o un líquido y los sustratos o solutos, dos o más sustancias que hay que separar.Los sustratos se disuelven previamente en un disolvente, o son introducidos directamente en estado de vapor.
Cuando entran en contacto con la fase estacionaria, se distribuyen entre las dos fases,la móvil y la estacionaria. Cuanto mayor es el tiempo que pasan en la fase estacionaria, tanto más lentamente avanzan por la columna y mejor es la separación.

Objetivo
Realizar la separación ydeterminación de una mezcla de pesticidas mediante la técnica de cromatografía liquida de alta resolución utilizando como detector un espectrofotómetro

Materiales y reactivos

Materiales
-Cromatógrafo líquido Shimadzu SPD-6A con detector UV-vis.
- Matraces aforados de 100 y 10 ml.
- Jeringa de inyección 100 micro litros
- Columna empaquetada C-18
Reactivos
- Acetonitrilo paracromatografía (fase móvil)
- Butóxido de piperonilo 10-2 M
- Fenitrotión 10-2 M

Disoluciones preparadas

- 10 ml de disolución de fenitrotión 10-4M

10⁻⁴ M = n / 10*10⁻³ ; n = 10⁻6 moles10⁻²M = 10-6 / V ; V= 10⁻⁴ L = 0,1 ml = 100 μl
Este es el volumen que hemos utilizado para preparar la disolución de fenitrotión 10-4 M.

-10 ml de disolución de butóxido 10-4 M10⁻⁴ M = n / 10 x 10⁻³ ; n = 10⁻6 moles
10⁻²M = 10-6 / V ; V= 10⁻⁴ L = 0,1 ml = 100 μl
Este es el volumen que hemos utilizado para preparar la disolución de butóxido 10-4 M....