Preparacion de agar

Páginas: 5 (1130 palabras) Publicado: 17 de septiembre de 2012
Sabouraud Glucosado Agar 

Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de hongos patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de levaduras.

Fundamento
Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo, etc.). 
En el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, sonlos nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el pH ácido, favorecen el crecimiento de hongos por sobre el de bacterias.
Además, al medio de cultivo, pueden agregarse otros agentes selectivos de crecimiento.
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
Pluripeptona | 10.0 | Suspender 65 g del polvo por litro de aguadestilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuentemente y hervir 1 minuto hasta disolver. Distribuir y esterilizar 15 minutos a 118-121°C. Mantener en lugar fresco, pues la exposición al calor hidroliza los componentes. Distribuir en placas o en tubos con cierre hermético  |
Glucosa | 40.0 | |
Cloranfenicol | 0.05 | |
Agar | 15.0 | |
pH final: 5.6 ± 0.2 |Siembra
Depende del uso, puede ser tanto en tubo como en placa. Consultar referencias de métodos recomendados.

Incubación
El tiempo de incubación dependerá del microorganismo que se esté buscando aislar.

Resultados
Microorganismos | Crecimiento |
Saccharomyces cerevisiae | Bueno |
Aspergillus niger | Bueno |
Candida albicans ATCC 10231 | Bueno |
Características del medio
Mediopreparado: ámbar claro, ligeramente opalescente sin ningún precipitado. 

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación |
x 100g :Código:  B02-150-05 | x 500g :Código:  B02-150-06 | 6x50ml: B04-150-84 |
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/sabouraudgluagar.htm

Medios de cultivo:
En líneas generales, todos los medios de cultivoutilizados en micología han de contener los nutrientes suficientes para asegurar el desarrollo de los hongos (carbono, nitrógeno, vitaminas, oligoelementos, etc). El pH ha de ser ligeramente ácido para facilitar el crecimiento de los hongos e inhibir al mismo tiempo el desarrollo de otros microorganismos.
Se añadirán antibióticos antibacterianos para inhibir el crecimiento de las bacterias saprofitas quesuelen contaminar las muestras. Los más usados son el Cloranfenicol y la Gentamicina. Se añade también actidiona (Cicloheximida) que inhibe el desarrollo de hongos saprofitos ambientales (aunque tiene el inconveniente de que inhibe también el crecimiento de Cryptococcus neoformans).
Generalmente utilizaremos varios medios de cultivo diferentes, ya sea en en placa o en tubo.
Los medios en placatienen la ventaja de ofrecer una gran superficie para el aislamiento pero, para soportar la deshidratación durante el largo período de incubación a que van a ser sometidos (un mes o más), has de contener una gruesa capa de medio (25 a 40 ml). Son más peligrosos a la hora de su manipulación y fáciles de contaminar. Por contra, los medios en tubo tienen una superficie de trabajo mucho más pequeña,pero ofrecen máxima seguridad en su manipulación y buena resistencia a la deshidratación y a la contaminación.
En el momento de la siembra, y aun sabiendo que ninguna combinación de medios de cultivo va a cubrir totalmente el abanico de posibilidades, han de seleccionarse adecuadamente los medios a utilizar en función del tipo de muestra y de los microorganismos fúngicos sospechados. Si la muestraprocede de zonas presuntamente contaminadas, es fundamental incluir, junto a los medios normales, medios que contengan sustancias inhibitorias de bacterias y hongos saprofitos (cloranfenicol, gentamicina, cicloheximida).
Tanto la muestra como las placas y tubos que se van a sembrar deben manipularse, para mayor seguridad del técnico y para evitar contaminaciones ambientales, en campana de flujo...
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