Propiedades De Proteinas

Práctica 9. Propiedades fisicoquímicas de las proteínas
Discusión
En esta práctica llevamos a cabo una serie de pruebas para conocer las propiedades físicas y químicas de las proteínas.
Se realizaron las siguientes pruebas:
-Prueba de Biuret
-Desnaturalización por calor
-Desnaturalización por solventes orgánicos
-Precipitación por aniones
-Precipitación por cationes (sales de metalespesados)
-Diálisis
- Equilibrio de Donnan
Prueba de Biuret: esta prueba nos permite detectar la presencia de una proteína en una solución acuosa, ya que el reactivo que se usa contiene sulfato de cobre cuyos iones cobre se adhieren a los átomos de hidrógeno presentes en los enlaces peptídicos mostrando un color violeta.
Utilizamos 5 diferentes soluciones: albumina de huevo, peptona, caseína,gelatina y agua destilada como control. Después de agregar el reactivo esperamos pocos minutos y pudimos observar que se formó un anillo violeta en la interfase de todas las soluciones a excepción del agua destilada, por lo que concluimos que en las soluciones con muestra efectivamente son proteínas.
Al consultar literatura encontramos que el reactivo de esta prueba al contener iones cobre debenunirse al nitrógeno de los enlaces peptídicos de las proteínas, por lo que esta prueba debe funcionar eficazmente para detectar la presencia de una proteína en una solución.
Desnaturalización por calor: uno de los factores que provocan la desnaturalización de las proteínas son las temperaturas muy elevadas. Esta prueba consiste en elevar la temperatura de las soluciones sometiéndolas a un baño deagua hirviendo para detectar la presencia de proteínas globulares que forman un coágulo blanco como consecuencia de su desnaturalización.
En esta prueba las muestras que resultaron positivas fueron las proteínas globulares, albúmina de huevo y caseína, formando un coagulo blanco en la solución.
Desnaturalización por solventes orgánicos: Las proteínas al encontrarse en un medio con una altaconstante dieléctrica mantienen su estructura terciaria. Al adicionarse solventes orgánicos a las muestras se forma un precipitado blanco, esto es debido a la baja constante dieléctrica que posee el solvente y que provoca la desnaturalización de la proteína.
Los solventes orgánicos que utilizamos fueron fenol y acetona. Las soluciones que mostraron coagulo blanco fueron las proteínas globulares(albúmina de huevo, caseína y gelatina).
Precipitación por aniones: Al añadir iones negativos a la solución éstos se unen a las proteínas cargadas positivamente, por consecuencia la proteína pierde su estructura y se desnaturaliza. Observamos que la proteína se ha desnaturalizado cuando se forman pequeños grumos en la solución.
Las soluciones que utilizamos fueron el acido tricloroacético y acidopícrico. El cambio que sufrieron las muestras (albúmina de huevo, caseína y gelatina) fue la formación de grumos blancos, lo cual nos demostró que la proteína se desnaturalizó.
Precipitación por cationes: Cuando añadimos iones cargados positivamente a una solución, estos iones se van a adherir a la proteína cargada negativamente formando un precipitado y desnaturalizando la proteína.
Los reactivosutilizados en esta prueba fueron acetato de plomo y cloruro de mercurio. Con el acetato de plomo observamos que tanto la albúmina de huevo como la caseína y la gelatina presentaron un cambio, formando coágulos blancos, mientras que la peptona no presento un cambio significativo.
Las muestras de albúmina de huevo y de gelatina mostraron un cambio cuando se les añadió cloruro de mercurio formandotambién coágulos blancos.
Diálisis: Debido al gran tamaño molecular de las proteínas, éstas moléculas no pueden atravesar o difundirse a través de membranas dialíticas, lo que nos sirve como un proceso de purificación de proteínas.
En la prueba utilizamos celofán para que actuara como membrana dialítica y en su interior se colocó muestra de albúmina de huevo. En nuestro experimento control...